酶促合成阿昔洛韋糖基衍生物及其性質(zhì)研究.pdf

1、阿昔洛韋是一種重要的嘌呤類(lèi)抗病毒藥物，具有廣譜抗病毒性質(zhì)，但由于阿昔洛韋水溶性差，生物利用度低等缺點(diǎn)，限制了它的應(yīng)用。為了克服阿昔洛韋的缺點(diǎn)，合成和篩選出具有良好水溶性和抗病毒活性的阿昔洛韋衍生物，本文選擇具有多種生物活性的糖分子作為修飾基團(tuán)，酶促合成了阿昔洛韋-半乳糖衍生物、阿昔洛韋-甘露糖衍生物、阿昔洛韋-葡萄糖衍生物，并對(duì)糖基衍生物的體外水溶性、釋放原藥的速率及抗病毒能力進(jìn)行了考察。
　　 論文首先通過(guò)不同鏈長(zhǎng)的丁二酸、己

2、二酸、癸二酸為原料制備出了相應(yīng)的丁二酸二乙烯酯、己二酸二乙烯酯及癸二酸二乙烯酯作為阿昔洛韋與糖的連接臂。分離純化出不同鏈長(zhǎng)的二酸二乙烯酯進(jìn)一步與葡萄糖、甘露糖及半乳糖進(jìn)行酶促酯交換反應(yīng)，從而得到三種單糖乙烯酯。通過(guò)對(duì)產(chǎn)率及反應(yīng)活性的研究，篩選出了己二酸二乙烯酯為最適的阿昔洛韋與葡萄糖、半乳糖、甘露糖的連接臂。
　　 論文進(jìn)而以單糖乙烯己二酯為糖基供體，酶促酯交換合成阿昔洛韋糖基衍生物，并分別研究了酶源、反應(yīng)介質(zhì)、酶的添加量、反應(yīng)

3、底物摩爾比、反應(yīng)溫度及反應(yīng)時(shí)間對(duì)阿昔洛韋糖基衍生物產(chǎn)率的影響。結(jié)果表明最適反應(yīng)條件為：以枯草桿菌蛋白酶為生物催化劑，在吡啶中反應(yīng)，酶濃度為20 mg/mL，單糖乙烯己二酯與阿昔洛韋的摩爾比為1:2，反應(yīng)溫度為50℃，反應(yīng)時(shí)間為72 h。
　　 論文對(duì)阿昔洛韋糖基衍生物的性質(zhì)研究中，首先選擇在體外模擬胃液pH值(1.2)和腸液的pH值(7.4)的條件下，采用高效液相色譜法考察阿昔洛韋糖基衍生物的水溶性和釋放阿昔洛韋原藥的速率?？梢?/p>

4、得到，在pH1.2及pH7.4條件下，阿昔洛韋糖基衍生物的水溶性和阿昔洛韋原藥相比得到了顯著提高(>100倍)，糖基衍生物的原藥釋放速率均滿(mǎn)足一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程。其中阿昔洛韋-葡萄糖衍生物的水溶性最高、釋放速率最快。
　　 阿昔洛韋糖基衍生物的體外抗乙肝病毒的能力以HepG2.2.15細(xì)胞模型評(píng)價(jià)。通過(guò)MTT法測(cè)定糖基衍生物和阿昔洛韋原藥的細(xì)胞毒性，ELISA測(cè)定了阿昔洛韋糖基衍生物和阿昔洛韋原藥對(duì)HBsAg和HBeAg的抑制率