兩親接枝共聚膦腈的納米毒性的初步研究.pdf

1、兩親接枝聚膦腈共聚物作為藥物緩控釋載體材料,已在藥物靶向治療和抗腫瘤治療領(lǐng)域呈現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。本課題在聚膦腈分子主鏈上通過親和取代反應(yīng)引入了聚乙二醇親水性的側(cè)鏈,N,N-二異丙基乙二胺和絲氨酸甲酯的疏水性側(cè)鏈,得到了新型的兩親接枝聚膦腈共聚物(PDS),聚合物的結(jié)構(gòu)用FT-IR、1HNMR表征,水溶液中自組裝形成納米粒后粒徑在120nm-130nm范圍內(nèi)。
　　 考察聚合物納米粒在血液中的生物相容性,包括血漿蛋白對聚合物納米

2、粒的吸附實(shí)驗(yàn)和巨噬細(xì)胞(THP-1)定量攝取實(shí)驗(yàn)。巨噬細(xì)胞對聚合物的吞噬作用受血漿蛋白調(diào)理作用的影響,聚合物材料由于聚乙二醇親水鏈的空間排阻作用,血漿蛋白的粘附量減少,具備較強(qiáng)的抗調(diào)理吞噬的能力,實(shí)現(xiàn)了血液長循環(huán)的目的.比較了兩種帶不同電性的聚合物納米粒的血漿蛋白吸附行為,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,荷正電的納米粒子在血液中更容易被單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)(MPS)消除。
　　 用熒光染料FITC標(biāo)記兩親接枝聚膦腈共聚物(PDS),用采熒光分光光度法

3、測定聚合物納米粒在荷MCF-7裸鼠血漿和組織中的分布,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明聚合物材料在腫瘤部位有穩(wěn)定的蓄積,在血液中的滯留時(shí)間較長,肝腎分布量較大。
　　 將正常人肝細(xì)胞(L-02)作為研究對象,考察聚合物材料對人體正常細(xì)胞的毒性作用和對細(xì)胞損傷機(jī)制的研究。采用激光共聚焦顯微鏡觀察肝細(xì)胞對熒光標(biāo)記材料的攝取和細(xì)胞內(nèi)分布,結(jié)果說明攝取量與濃度呈正相關(guān),材料分布在細(xì)胞漿,未入核。比較了含有裸露伯氨基-NH2的PDS-NH2和無裸露伯氨基的P

4、DS-BOC對肝細(xì)胞毒性情況的異同:兩種聚合物材料與肝細(xì)胞孵育24小時(shí)后,MTT實(shí)驗(yàn)和LDH含量測定結(jié)果表明,聚合物材料PDS-BOC和PDS-NH2只在高濃度時(shí)對肝細(xì)胞有一定毒性,PDS-NH2材料毒性比PDS-BOC稍大;由肝細(xì)胞凋亡/壞死率實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明,兩種聚合物材料PDS-BOC和PDS-NH2引起細(xì)胞凋亡程度輕微,細(xì)胞凋亡率呈現(xiàn)濃度相關(guān)性,在高濃度時(shí)引起的細(xì)胞凋亡率相對明顯,高濃度的聚合物材料PDS-NH2除了誘發(fā)細(xì)胞凋亡,也

5、誘發(fā)細(xì)胞壞死;說明伯氨基作為潛在的毒性基團(tuán),引起細(xì)胞膜和細(xì)胞器膜的損傷,增加了材料毒性。肝細(xì)胞與高濃度聚合物材料(0.5mg/ml)作用時(shí),細(xì)胞內(nèi)ROS水平升高、細(xì)胞線粒體膜電位下降、ATP含量下降以及凋亡蛋白Caspase3和Caspase9活性增加,由這一系列分析結(jié)果可以推斷:聚合物材料誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡是通過內(nèi)源性即線粒體損傷通路進(jìn)行的。
　　 將正常人腎細(xì)胞(HK-2)作為研究對象,考察聚合物材料PDS-BOC和PDS-NH2