基于代謝組學(xué)的民族藥燈盞細(xì)辛、沙棘有效性評(píng)價(jià)及作用機(jī)制研究.pdf

1、民族藥在治療心腦血管等復(fù)雜疑難疾病方面相對(duì)于單一化學(xué)成分藥物有其獨(dú)到之處。但是對(duì)民族藥有效性和安全性的現(xiàn)代認(rèn)識(shí)和評(píng)價(jià)成為制約其發(fā)展的關(guān)鍵問(wèn)題,尤其應(yīng)在民族藥的有效性評(píng)價(jià)和作用機(jī)制研究的思路和方法等方面進(jìn)行總結(jié)和提煉,建立一套體現(xiàn)民族醫(yī)藥特點(diǎn)、系統(tǒng)論和還原論相結(jié)合的研究新方法。
　　苗藥燈盞細(xì)辛和藏藥沙棘分別是臨床上用于防治缺血性中風(fēng)和胸痹心痛的療效確切的常用藥,二者的應(yīng)用歷史悠久,在民族藥中占有十分重要的地位,如很多藏藥制劑中均含

2、有沙棘膏,且均被藥典收載,具有較高的市場(chǎng)占有率,此外二者的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)都是業(yè)已證明對(duì)心腦血管疾病具有明顯治療作用的黃酮類成分,故以苗藥燈盞細(xì)辛和藏藥沙棘為例,具有較好的代表性和推廣價(jià)值。
　　目的：
　　在民族醫(yī)藥學(xué)理論體系的指導(dǎo)下,結(jié)合系統(tǒng)化學(xué)生物學(xué)的思路和代謝組學(xué)的方法,以治療缺血性中風(fēng)的苗藥燈盞細(xì)辛和防治胸痹心痛證的藏藥沙棘為例,嘗試建立基于代謝組學(xué)的民族藥防治心腦血管疾病的有效性評(píng)價(jià)和作用機(jī)制研究的新方法。
　

3、　方法：
　　應(yīng)用線栓法阻塞大腦中動(dòng)脈致大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型和腎上腺素加冰水致急性血瘀證大鼠模型,分別進(jìn)行苗藥燈盞細(xì)辛和藏藥沙棘的藥效學(xué)研究;同時(shí)基于超高效液相色譜結(jié)合四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-Q TOF/MS)和主成份分析、偏最小二乘法-判別分析等模式識(shí)別技術(shù)對(duì)造模和給藥前后大鼠的尿液進(jìn)行代謝譜型分析,開(kāi)展基于代謝組學(xué)的民族藥有效性評(píng)價(jià)和作用機(jī)制研究。
　　結(jié)果：
　　(1)藥效學(xué)研究:燈盞細(xì)辛注射

4、液能明顯地減少腦梗死面積,改善大鼠腦組織形態(tài)學(xué)病變,并能促進(jìn)尼氏小體數(shù)量的增加,這可能是通過(guò)減少海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子——Bax蛋白表達(dá),對(duì)抗缺血再灌注后誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,從而發(fā)揮腦保護(hù)作用的;亦能明顯促進(jìn)神經(jīng)功能缺失體征的提前恢復(fù);綜合各指標(biāo)的結(jié)果提示,量-效關(guān)系不規(guī)則,療效由強(qiáng)到弱依次為:低劑量>高劑量>中劑量。
　　沙棘提取物能夠明顯降低急性血瘀證大鼠的血液粘稠度和紅細(xì)胞濃度,減弱紅細(xì)胞聚集能力和血液凝固能力,最終改善急性

5、血瘀大鼠血液流變學(xué)的“濃、粘、凝、聚”等異常特征;其中又以沙棘提取物高劑量和低劑量的作用最明顯。
　　(2)基于代謝組學(xué)的有效性評(píng)價(jià):燈盞細(xì)辛注射液和沙棘提取物能使模型動(dòng)物的代謝譜型向正常動(dòng)物回歸,其中低劑量?jī)?yōu)于高劑量,后者又優(yōu)于中劑量。
　　(3)基于代謝組學(xué)的作用機(jī)制研究:燈盞細(xì)辛注射液減弱或取消了外界刺激因素“線栓法阻塞大腦中動(dòng)脈”對(duì)機(jī)體的作用,使模型大鼠的代謝譜型向正常動(dòng)物回歸,其作用機(jī)制可能與犬尿喹啉酸、琥珀酰鳥(niǎo)氨

6、酸和亮氨酰脯氨酸等潛在生物標(biāo)志物有關(guān),它們又有可能涉及“色氨酸-犬尿喹啉酸”和“琥珀酰鳥(niǎo)氨酸-尿素循環(huán)-NO”等代謝途徑。
　　沙棘提取物減弱或取消了外界刺激因素“腎上腺素結(jié)合冰水”對(duì)機(jī)體的作用,使模型大鼠的代謝譜型向正常動(dòng)物回歸,其作用機(jī)制可能與苯丙氨酸、色氨酸、琥珀酰鳥(niǎo)氨酸、犬尿喹啉酸、鵝去氧膽酸和膽酸等潛在生物標(biāo)志物有關(guān),它們有可能涉及“苯丙氨酸-酪氨酸-兒茶酚胺類”、“色氨酸-5-羥色胺”、“琥珀酰鳥(niǎo)氨酸-尿素循環(huán)-NO”

7、和“膽固醇-膽汁酸-膽紅素”等代謝途徑。
　　結(jié)論：
　　本文證實(shí)了代謝組學(xué)對(duì)苗藥燈盞細(xì)辛和藏藥沙棘有效性的評(píng)價(jià)與藥效學(xué)研究結(jié)果的一致性;代謝組學(xué)還揭示了民族藥所調(diào)控的機(jī)體潛在生物標(biāo)志物及其代謝途徑,豐富了民族藥的作用機(jī)制研究;此外本文闡釋了急性血瘀“證”本質(zhì)的生化物質(zhì)基礎(chǔ)。故代謝組學(xué)可以作為民族藥的有效性評(píng)價(jià)和作用機(jī)制研究的新方法,亦拓寬了民族藥現(xiàn)代研究的思路。
　　創(chuàng)新點(diǎn)：
　　(1)本文揭示了腦缺血再灌注損