MCP-1DNA疫苗治療Pristane誘導(dǎo)BALB-c狼瘡鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：應(yīng)用單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）基因片段的DNA疫苗免疫Pristane誘導(dǎo)BALB/c鼠狼瘡模型，研究MCP-1DNA疫苗對(duì)鼠狼瘡模型的免疫抑制作用以及對(duì)腎臟的保護(hù)效果。
　　 方法：建立Pristane誘導(dǎo)BALB/c小鼠狼瘡模型，分別設(shè)狼瘡模型組、疫苗組、空質(zhì)粒組和正常對(duì)照組。純化制備含有編碼MCP-1基因片段的DNA疫苗，接種于Pristane誘導(dǎo)的BALB/c鼠狼瘡模型。測(cè)定各組小鼠體質(zhì)量、24小時(shí)尿蛋白定

2、量、ELISA法測(cè)定MCP-1抗體的水平、免疫熒光法檢測(cè)血清ANA；石蠟包埋HE染色光鏡下觀察小鼠腎臟病理變化、免疫組化標(biāo)記MCP-1、CD68在腎臟內(nèi)的表達(dá)。
　　 結(jié)果：（1）體質(zhì)量測(cè)定：至第24周時(shí)正常對(duì)照組（25±1.0g）和疫苗組（24±2.3g）高于狼瘡模型組（18±2.7g）和空質(zhì)粒組（18.1±2.5g）（P＜0.05）。（2）尿蛋白定量（24h）：24周時(shí)正常對(duì)照組（0.189±0.089mg）和疫苗組（0.2

3、18±0.152mg）尿蛋白水平低于狼瘡模型組（0.696±0.321mg,）和空質(zhì)粒組（0.716±0.452mg）（P＜0.05）。（3）血清MCP-1抗體水平：24周時(shí)正常對(duì)照組（136.3±43.6 pg/ml）、狼瘡模型組（153.2±46.5pg/ml）和空質(zhì)粒組（146.3±31.6 pg/ml）MCP-1抗體水平明顯低于疫苗組（513.6±76.3 pg/ml）（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（4）ANA抗體：24周

4、時(shí) ANA抗體在正常對(duì)照組0只陽(yáng)性，其余3組陽(yáng)性率70.8％，各組之間ANA陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（5）腎臟組織病理學(xué)改變：HE染色顯示狼瘡模型組和空質(zhì)粒組腎間質(zhì)可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和腎小球損傷，疫苗組炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少，正常對(duì)照組未見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。（6）腎臟免疫組織化學(xué)染色（標(biāo)記MCP-1、CD68）：狼瘡模型組、空質(zhì)粒組小鼠腎小管和腎間質(zhì)浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞胞質(zhì)有MCP-1、CD68的表達(dá)，以腎小管表達(dá)明顯。而疫苗組二者的表達(dá)明顯減少