硼替佐米對淋巴瘤Raji細(xì)胞增殖及凋亡的影響.pdf

1、非霍奇金淋巴瘤（NHL）是一組發(fā)生于淋巴結(jié)和（或）結(jié)外部位淋巴組織的惡性腫瘤，通常NHL患者對傳統(tǒng)的化療方案（如COP，CHOP等）表現(xiàn)出較好的反應(yīng)，但多數(shù)往往在達(dá)到緩解后數(shù)月至數(shù)年的時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)。加大劑量的強(qiáng)化療僅能使部分患者達(dá)到長期的緩解，但同時(shí)帶來較大的藥物毒性及較高致死率。尋求治療NHL新藥及新方案成了當(dāng)前的一個(gè)緊迫問題。 體外和動物實(shí)驗(yàn)顯示蛋白酶體抑制劑硼替佐米對包括多發(fā)性骨髓瘤、結(jié)腸癌、慢性淋巴細(xì)胞白血病和胰腺癌在

2、內(nèi)的許多惡性腫瘤有抗癌活性，并具有明顯的抗淋巴瘤作用，其作用機(jī)制涉及特異性地抑制泛素-蛋白酶體通路（UPP），從而發(fā)揮阻止腫瘤細(xì)胞生長、播散及血管生成的作用，其毒副作用小，并與常規(guī)化療藥物無交叉耐藥性。國外基礎(chǔ)研究顯示硼替佐米體外單藥及聯(lián)合其他藥物等均可以抑制多種惡性淋巴瘤細(xì)胞株的增殖。 本實(shí)驗(yàn)從細(xì)胞生長增殖、凋亡及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)等細(xì)胞生物學(xué)行為的角度，探討硼替佐米對淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞的影響，為臨床尋找新的治療藥物提供理

3、論依據(jù)。我們采用Wright-Giemsa染色法觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化；MTT法分析硼替佐米對淋巴瘤細(xì)胞增殖抑制作用；采用FCM分析藥物對細(xì)胞凋亡的影響；用半定量RT-PCR分析細(xì)胞內(nèi)NF-κB及caspase-3的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，硼替佐米作用細(xì)胞24h后，可觀察到細(xì)胞出現(xiàn)凋亡形態(tài)學(xué)改變。硼替佐米可增強(qiáng)對Raji細(xì)胞的增殖抑制率，其作用呈濃度和時(shí)間依賴性（P<0.05）。并且與對照組相比，硼替佐米對Raji細(xì)胞的凋亡率具有顯著性差

4、異（P<0.05）。同時(shí)不同濃度的硼替佐米處理細(xì)胞株后用半定量RT-PCR分析細(xì)胞內(nèi)NF-κB的表達(dá)水平均低于對照組（P<0.05），并隨作用濃度增加表達(dá)水平越低，同時(shí)caspase-3的表達(dá)水平均高于對照組，并隨作用濃度增加表達(dá)水平越高。 綜上所述，硼替佐米對Raji細(xì)胞有增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用，可以下調(diào)細(xì)胞內(nèi)NF-κB表達(dá)水平及上調(diào)caspase-3的表達(dá)水平，NF-κB基因和caspase-3基因很可能參與了硼替佐米誘導(dǎo)R