五味子提取物對(duì)小鼠輻射損傷的免疫保護(hù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究五味子提取物對(duì)電離輻射所致小鼠免疫功能損傷的保護(hù)作用，分析其對(duì)小鼠胸腺組織細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響，探討五味子提取物防治小鼠電離輻射所致免疫功能損傷的作用機(jī)制。
　　 方法：1、將48只清潔級(jí)BALB/c小鼠，體重14～16g，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，即五味子（Schisandra Chinensis，SC）預(yù)防治療組（五味子灌胃+照射），生理鹽水組（NS+照射）和正常對(duì)照組（不照射），每組16只。五味子預(yù)防治

2、療組（SC）小鼠每天給予五味子提取物（4g/kg體重）灌胃，每天一次，連續(xù)7天；正常對(duì)照組（Normal control）及生理鹽水組（NS）組均給予等量的生理鹽水灌胃，每天一次，連續(xù)7天，灌胃后禁食水30分鐘。最后一次給藥結(jié)束后1h給予60Co-γ線照射。
　　 2、用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)小鼠外周血白細(xì)胞總數(shù)及分類變化，用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)經(jīng)60Co-γ線照射24h后小鼠外周血中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞的值，用免疫濁度法檢測(cè)

3、小鼠血清IgG及補(bǔ)體C3的含量。
　　 3、采用Gimsa染色顯微鏡觀察胸腺組織細(xì)胞形態(tài)學(xué)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組小鼠胸腺組織細(xì)胞凋亡率的變化。
　　 4、通過(guò)半定量RT-PCR法檢測(cè)各組小鼠胸腺組織bcl-2和Fas mRNA表達(dá)的變化。
　　 5、免疫組化染色法檢測(cè)各組小鼠胸腺組織bcl-2和Fas蛋白表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：1、與正常組小鼠相比，經(jīng)60Co-γ射線照射24h后，NS對(duì)照組小鼠外周血白細(xì)

4、胞總數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)量均明顯下降（P<0.01）；SC預(yù)防治療組小鼠較NS對(duì)照組小鼠外周血白細(xì)胞總數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)量均明顯升高（P<0.01）；SC預(yù)防治療組與正常組小鼠外周血白細(xì)胞總數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)量比較無(wú)顯著性差異（P>0.05）。
　　 2、與正常對(duì)照組相比，NS對(duì)照組小鼠外周血中CD3+、CD4+和CD8+T細(xì)胞值、IgG及補(bǔ)體C3水平明顯降低（P<0.01）； SC預(yù)防治療組小鼠較NS組小鼠外周血中CD3+、CD4+和CD8

5、+T細(xì)胞值、IgG及補(bǔ)體C3水平均明顯升高（P<0.01），但與正常組小鼠比較，無(wú)顯著性差異（P>0.05）。
　　 3、與正常組相比，經(jīng)60Co-γ射線照射24h后，NS對(duì)照組小鼠胸腺細(xì)胞明顯減少，胸腺細(xì)胞凋亡率升高（正常組和NS對(duì)照組的細(xì)胞凋亡率分別為21.32±2.56％和1.98±0.21％），P<0.01； SC預(yù)防治療組較NS組小鼠胸腺細(xì)胞增多，胸腺細(xì)胞凋亡率降低（SC預(yù)防治療組和NS組的細(xì)胞凋亡率分別為2.87±1

6、.03％和21.32±2.56％），P<0.01，但與正常組小鼠比較，無(wú)顯著性差異（P>0.05）。
　　 4、經(jīng)60Co-γ射線照射24h后，NS對(duì)照組小鼠胸腺組織bcl-2 mRNA表達(dá)水平較正常組小鼠明顯降低，F(xiàn)as mRNA表達(dá)水平明顯升高（P<0.01）；SC預(yù)防治療組較NS組小鼠胸腺組織bcl-2 mRN表達(dá)水平明顯升高，F(xiàn)as mRN表達(dá)水平降低（P<0.01）。
　　 5、經(jīng)60Co-γ射線照射24h后，

7、NS對(duì)照組小鼠胸腺組織bcl-2蛋白表達(dá)水平較正常組明顯降低，F(xiàn)as表達(dá)水平明顯升高（P<0.01）； SC預(yù)防治療組較NS組小鼠胸腺組織bcl-2蛋白表達(dá)水平明顯升高，F(xiàn)as表達(dá)水平明顯降低（P<0.01）。
　　 結(jié)論：1、五味子提取物對(duì)60Co-γ輻射所致小鼠免疫損傷有預(yù)防作用。
　　 2、五味子提取物可抑制60Co-γ輻射所致的小鼠胸腺細(xì)胞凋亡。
　　 3、五味子提取物可能通過(guò)升高小鼠胸腺細(xì)胞凋亡抑制基因