新型光敏劑CPD4聯(lián)合阿霉素對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖及周期作用的研究.pdf

1、目的：新型光敏劑CPD4聯(lián)合阿霉素(ADM)對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖和周期的研究。從細(xì)胞水平、物理學(xué)角度闡述ADM對(duì)新型光敏CPD4光動(dòng)力效應(yīng)產(chǎn)生影響的作用機(jī)制，為臨床開(kāi)辟新的治療方法提供理論依據(jù)。 方法：實(shí)驗(yàn)分為六個(gè)階段進(jìn)行。分別采用MTT比色法篩選阿霉素濃度；分析阿霉素與光敏劑CPD4的光譜特點(diǎn)，測(cè)兩者混合液的吸收光譜，觀察阿霉素對(duì)CPD4吸收光譜的影響；染料排斥法觀察各組細(xì)胞的抑制率；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析各組細(xì)胞凋亡率；用流式細(xì)

2、胞術(shù)分析各組細(xì)胞周期的變化及測(cè)量細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度。 結(jié)果： 1、ADM對(duì)MCF-7細(xì)胞抑制率有明顯的時(shí)間-濃度依賴效應(yīng)，低濃度組為10ng/ml、20ng/ml，對(duì)MCF-7細(xì)胞的抑制率<10％，高濃度組50ng/ml對(duì)MCF-7細(xì)胞的抑制率<25％。 2、阿霉素的兩個(gè)吸收峰位于233m、480nm。ADM與光敏劑的混合溶液的熒光光譜顯示，兩者的熒光峰發(fā)生藍(lán)移。 3、ADM預(yù)處理MCF-7細(xì)胞24小時(shí)、4

3、8小時(shí)后加入CPD4孵育2小時(shí)光照，24小時(shí)后0.2％伊紅排斥法測(cè)細(xì)胞抑制率，倒置顯微鏡下觀察，初步顯示ADM能增強(qiáng)CPD4的光動(dòng)力效應(yīng)。 4、流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡率結(jié)果顯示ADM預(yù)處理后能夠增加CPD4對(duì)MCF-7的光動(dòng)力效應(yīng)。 5、ADM預(yù)處理MCF-7細(xì)胞相應(yīng)的時(shí)，24小時(shí)后分析細(xì)胞周期，細(xì)胞主要阻滯在G2/M期。PDT主要將細(xì)胞阻滯在G0/G1。聯(lián)合用藥組主要將細(xì)胞阻滯在G2/M期。 6、ADM(20n

4、g/ml)預(yù)處理MCF-7細(xì)胞，對(duì)細(xì)胞熒光強(qiáng)度無(wú)明顯影響；CPD4孵育2小時(shí)后對(duì)照組熒光強(qiáng)度較平穩(wěn)，ADM預(yù)處理24小時(shí)、48小時(shí)組細(xì)胞熒光強(qiáng)度逐漸降低。三組細(xì)胞的熒光強(qiáng)度均在CPD4孵育2小時(shí)最高，且ADM預(yù)處理48小時(shí)組>預(yù)處理24小時(shí)>對(duì)照組。 結(jié)論： 1、ADM3個(gè)濃度分別為10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml。 2、ADM對(duì)細(xì)胞無(wú)光動(dòng)力效應(yīng)；混合溶液熒光光譜顯示ADM可能與光敏劑結(jié)合，實(shí)驗(yàn)中避