伽瑪?shù)墩丈浼凹讖?qiáng)龍治療對(duì)膠質(zhì)細(xì)胞CX43及GFAP表達(dá)的影響.pdf

1、目的：γ刀放射外科已成為現(xiàn)代神經(jīng)外科的重要組成部分，在現(xiàn)行的影像和計(jì)劃系統(tǒng)條件下，有時(shí)很難做到靶區(qū)內(nèi)能完全除外正常腦組織，病灶周圍的神經(jīng)組織仍會(huì)被放射外科治療影響，導(dǎo)致部分患者接受治療后正常神經(jīng)組織發(fā)生放射損傷，其確切機(jī)制尚不清楚。大量的放射外科試驗(yàn)已證明膠質(zhì)增生是放射損傷的主要形式，輻射損傷后膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目增多，免疫組化染色膠質(zhì)纖維酸蛋白（glial fibrillary acid protein，GFAP）表達(dá)增強(qiáng)，兩者的嚴(yán)重程度相關(guān)

2、。迄今為止γ刀治療后放射損傷的發(fā)生機(jī)理尚不明確，縫隙連接蛋白（Connexin，Cx）被認(rèn)為是一個(gè)抑癌基因家族具有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的作用，其機(jī)制可能與Cx的非通訊作用有關(guān)，近來(lái)的研究已經(jīng)證明縫隙連接蛋白43（Cx43）的表達(dá)減少或缺失常導(dǎo)致細(xì)胞的異常生長(zhǎng)甚至腫瘤的發(fā)生。糖皮質(zhì)激素具有抗炎和減輕水腫的作用，臨床上已廣泛應(yīng)用于中樞神經(jīng)放射性損傷的治療，是伽瑪?shù)缎g(shù)后放射性腦水腫的重要治療手段，糖皮質(zhì)激素的藥理機(jī)制非常復(fù)雜，抑制細(xì)胞分裂和增生是

3、它的一種重要作用。此種作用可能與Cx表達(dá)的調(diào)控存在共同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。本實(shí)驗(yàn)研究了伽瑪?shù)墩丈浜竽z質(zhì)細(xì)胞Cx43和GFAP表達(dá)的變化以及放射性腦損傷中應(yīng)用糖皮質(zhì)激素對(duì)Cx表達(dá)的影響。初步探討了星形膠質(zhì)細(xì)胞間縫隙連接在放射傷性腦損傷中的變化規(guī)律以及腦組織膠質(zhì)增生及放射損傷發(fā)生的可能機(jī)制。為探索伽瑪?shù)缎g(shù)后放射損傷新的治療手段提供依據(jù)，為進(jìn)一步臨床應(yīng)用和研究提供參考。 方法：體外培養(yǎng)原代星形膠質(zhì)細(xì)胞（astrocytes，Ast）分為正

4、常對(duì)照組和γ刀照射組，后者經(jīng)γ刀照射（邊緣劑量4、8、12、16、20、24、28、32、34、36Gy），培養(yǎng)72小時(shí)后檢測(cè)GFAP、Cx43。32Gy組經(jīng)γ刀照射后隨機(jī)分為1、5、10、20、30、40μg/ml組及實(shí)驗(yàn)對(duì)照組，各組進(jìn)一步隨機(jī)分為36、48、72、96、120h5個(gè)亞組。各組膠質(zhì)細(xì)胞與相應(yīng)劑量甲基強(qiáng)的松龍（methylpredrtisolone，MP）共培養(yǎng)，于36～120h各時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)GFAP及Cx43。

5、結(jié)果：4～12Gy組與正常對(duì)照組無(wú)顯著差異，至16Gy組膠質(zhì)細(xì)胞開始增生，GFAP表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)大于正常對(duì)照組且呈劑量依賴性增高，至32Gy組GFAP表達(dá)達(dá)最大值。Cx43表達(dá)在12Gy組即開始明顯下降且Cx43表達(dá)呈計(jì)量依賴性減低，在24至32Gy降低尤為顯著至32Gy組達(dá)最低值。添加MP后20～30μg/ml組Cx43呈時(shí)間依賴性上調(diào)，同時(shí)GFAP表達(dá)雖仍呈時(shí)間依賴性上升但GFAP峰值低于試驗(yàn)對(duì)照組，峰值出現(xiàn)時(shí)間亦晚于試驗(yàn)對(duì)照組。