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文檔簡介
1、縫隙連接蛋白43(Connexin43,Cx43)是哺乳動物卵巢卵泡顆粒細(xì)胞間表達(dá)最多的一種縫隙連接蛋白,在卵泡發(fā)育、卵母細(xì)胞生長等環(huán)節(jié)中發(fā)揮重要作用。卵泡顆粒細(xì)胞Cx43的表達(dá)受促性腺激素的調(diào)節(jié),已經(jīng)發(fā)現(xiàn)卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone,F(xiàn)SH)可促進(jìn)發(fā)育卵泡顆粒細(xì)胞Cx43的表達(dá),加強(qiáng)顆粒細(xì)胞之間的縫隙連接。黃體生成素(Luteinizing hormone,LH)是否具有促進(jìn)Cx43表達(dá)的作用以
2、及具體的作用機(jī)理,尚未明確。此外,雄激素在卵泡發(fā)育和女性生育調(diào)節(jié)過程中同樣發(fā)揮重要作用,而雄激素對顆粒細(xì)胞Cx43表達(dá)的影響亦不明確。本研究以不同發(fā)育階段的雌性C57小鼠和卵巢以及原代培養(yǎng)的大鼠顆粒細(xì)胞為材料,應(yīng)用形態(tài)學(xué),細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)方法,研究小鼠生長發(fā)育過程中卵巢Cx43表達(dá)的模式,以及LH和雙氫睪酮(Dihydrotestosterone,DHT)對小鼠卵巢和大鼠顆粒細(xì)胞Cx43表達(dá)的影響及可能的機(jī)理。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3、顯示,在小鼠卵巢中,Cx43表達(dá)于卵巢顆粒細(xì)胞胞膜上,LHR表達(dá)在卵泡膜細(xì)胞、顆粒細(xì)胞及卵母細(xì)胞胞質(zhì)中。隨卵泡發(fā)育,顆粒細(xì)胞數(shù)量的增加,Cx43及LHR的表達(dá)明顯增強(qiáng)。使用不同濃度的LH及DHT體外孵育小鼠卵巢,發(fā)現(xiàn)LH及DHT均可促進(jìn)小鼠卵巢Cx43的表達(dá)。
對于原代培養(yǎng)21d大鼠顆粒細(xì)胞,Cx43表達(dá)于顆粒細(xì)胞胞質(zhì)和部分細(xì)胞膜上。LH和Wnt/β-catenin信號通路激動劑LiCl均可增加顆粒細(xì)胞Cx43的表達(dá),而使用W
4、nt/β-catenin信號通路抑制劑FH535,可減少LH誘導(dǎo)的Cx43表達(dá)。同樣,使用DHT和Wnt/β-catenin信號通路激動劑LiCl均可增加顆粒細(xì)胞Cx43的表達(dá),使用Wnt/β-catenin信號通路抑制劑FH535后,可減少DHT誘導(dǎo)的Cx43表達(dá)。
綜上所述,我們得到如下結(jié)論:
(1)小鼠自然生長狀態(tài)下,隨卵泡發(fā)育,顆粒細(xì)胞數(shù)量增加,Cx43及LHR表達(dá)明顯增強(qiáng);LH可能通過LHR調(diào)控卵泡顆粒細(xì)胞
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