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1、目的:從細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的角度探討化瘀、益氣養(yǎng)血、清熱中藥宮清顆粒防治藥物流產(chǎn)后異常子宮出血(簡稱藥流后出血)的作用機(jī)制,并探討流產(chǎn)藥物抗早孕的機(jī)理,豐富中醫(yī)學(xué)“產(chǎn)后多虛多瘀”理論的科學(xué)內(nèi)涵,為臨床防治本病提供實(shí)驗(yàn)室生物學(xué)依據(jù)。方法:研究分現(xiàn)代中醫(yī)文獻(xiàn)研究和臨床研究兩大部分。現(xiàn)代中醫(yī)文獻(xiàn)研究中,以防治藥流后出血的現(xiàn)代中醫(yī)文獻(xiàn)為研究對象,建立證治方藥數(shù)據(jù)庫,運(yùn)用文獻(xiàn)研究和統(tǒng)計學(xué)分析相結(jié)合的方法,從頻數(shù)分析、因子分析、聚類分析角度對本病病因
2、病機(jī)及證治規(guī)律進(jìn)行統(tǒng)計分析。臨床研究中,將180例患者隨機(jī)分為宮清藥流組、茜芷藥流組及單純藥流組,并設(shè)人工流產(chǎn)組(簡稱人流組)患者60例,在觀察臨床療效的同時,收集各組人早孕絨毛、蛻膜組織,透射電鏡下觀察絨毛及蛻膜組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化,并檢測細(xì)胞凋亡率(AR)、凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)指標(biāo)凋亡因子Fas信使核糖核酸(FasmRNA)、Fas配體信使核糖核酸(FasLmRNA)、凋亡因子Fas、Fas配體(FasL)、蛋白激酶C(PKC)、細(xì)胞內(nèi)
3、鈣離子濃度([Ca2+]i)表達(dá)變化,分析指標(biāo)間的相關(guān)性。結(jié)果:現(xiàn)代中醫(yī)文獻(xiàn)研究顯示,瘀、虛、熱是藥流后異常子宮出血的基本病因病機(jī),活血化瘀、益氣養(yǎng)血、清熱是防治本病的基本原則,分析出了防治本病的高頻藥物及其配伍規(guī)律,為以活血化瘀、益氣養(yǎng)血、清熱法為組方原則的宮清顆粒防治本病提供了中醫(yī)文獻(xiàn)學(xué)依據(jù)。臨床研究發(fā)現(xiàn):宮清藥流組孕囊排出時間較茜芷藥流組及單純藥流組明顯縮短,均有非常顯著性差異(P<0.01);宮清藥流組子宮出血量明顯減少,與茜芷
4、藥流組比較有顯著性差異(P<0.05),與單純藥流組比較有非常顯著性差異(P<0.01);宮清藥流組子宮出血天數(shù)較單純藥流組明顯縮短,有顯著性差異(P<0.05),與茜芷藥流組比較無顯著性差異(P>0.05)。單純藥流組人早孕絨毛及蛻膜組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡傾向,凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)指標(biāo)檢測顯示FasmRNA及FasLmRNA基因表達(dá)、Fas及FasL蛋白表達(dá)、[Ca2+]i明顯升高,PKC蛋白表達(dá)明顯降低,與人流組比較有非常顯著性差
5、異(P<0.01)。宮清顆粒的作用趨勢與單純藥流藥物相同,其作用效果較茜芷藥流組與單純藥流組顯著,超微結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)宮清藥流組絨毛及蛻膜組織細(xì)胞出現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變,凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)指標(biāo)檢測顯示,AR、FasmRNA基因及FasLmRNA基因表達(dá)、Fas蛋白及FasL蛋白表達(dá)、[Ca2+]i較茜芷藥流組、單純藥流組明顯升高(P<0.05,P<0.01),PKC蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.05,P<0.01)。宮清藥流組AR與FasmRNA基
6、因、FasLmRNA基因、Fas蛋白、FasL蛋白表達(dá)及[Ca2+]i呈正相關(guān),與PKC蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān);FasmRNA基因表達(dá)與Fas蛋白表達(dá)呈正相關(guān),FasLmRNA基因表達(dá)與FasL蛋白表達(dá)呈正相關(guān),PKC蛋白表達(dá)與[Ca2+]i呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論:藥流藥物通過影響Fas/FasL、PKC、Ca2+介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,引起人早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞及蛻膜細(xì)胞凋亡,這可能是其抗早孕的機(jī)理之一。細(xì)胞凋亡不僅是藥流的啟動因素,同時凋亡障礙也
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