TIP30誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究.pdf

1、該研究中,我們用帶有人類野生型TIP30基因的復(fù)制缺陷型腺病毒載體感染人肝癌細(xì)胞系;HepG2(p53基因野生型)、Hep3B(p53基因缺陷型)和PLC/RPF/5(p53基因突變型),探討TIP30凋亡調(diào)控的分子機制.該研究從以下幾個方面入手:1.TIP30引起的細(xì)胞凋亡形態(tài)變化.2.TIP30對一些凋亡相關(guān)基因的調(diào)節(jié),如對p53,Bax,Bad,Bcl-xl的調(diào)節(jié).3.TIP30是否介導(dǎo)線粒體凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑:包括線粒體膜位變化、

2、對下游凋亡調(diào)節(jié)因子caspase-9,-3和PARP的激活.闡明TIP30參與凋亡的分子機制將為其在基因治療的臨床應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ).結(jié)論:1.通過對TIP30介導(dǎo)的肝癌細(xì)胞的凋亡率的檢測,我們確定:TIP30可引起肝癌細(xì)胞的凋亡.TIP30為一公認(rèn)的腫瘤生長抑制因子.2.在HepG2細(xì)胞中,TIP30介導(dǎo)的凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑為:上凋p53后促進(jìn)Bax和Bad從細(xì)胞質(zhì)向線粒體的躍遷,引起細(xì)胞色素c的釋放.然后激活caspase9,3和剪切P

3、ARP.因而TIP30介導(dǎo)的凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑為p53/mitochondria/caspase-9途徑.3.在無p53功能的Hep3B和PLC/RPF/5中,TIP30仍然能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡.說明TIP30誘導(dǎo)的p53依賴型凋亡只存在于某些細(xì)胞中,這些細(xì)胞中可能存在與TIP30起作用的其他因子,TIP30可能通過這些因子促進(jìn)Bad的躍遷、下調(diào)Bcl-xl和剪切PARP.雖然線粒體凋亡途徑已被深入研究,但其上游調(diào)節(jié)因子還有待于發(fā)現(xiàn),該研究為肝