肝細胞生成素（HPO）結(jié)構(gòu)與功能的研究.pdf

1、該論文選擇人肝癌細胞系HepG2,人肺腺癌細胞GLC-82作為靶細胞,圍繞HPO的結(jié)構(gòu)與其受體結(jié)合功能、體外刺激增殖活性和FAD結(jié)合性的關(guān)系,以及HPO的分泌機制展開研究.首先構(gòu)建、表達了HPO及其系列缺失體,建立了利用FACS分析HPO受體結(jié)合活性的體外檢測方法.將HPO及其缺失體經(jīng)FITC標記后,FACS分析結(jié)果以及體外刺激增殖結(jié)果表明,(1)參與組成HPO錐形結(jié)構(gòu)N-末端無規(guī)卷曲的1~10位氨基酸殘基對于HPO的受體結(jié)合活性具有一

2、定的貢獻,如果缺失這一段序列,會使其受體結(jié)合活性大大下降,相應(yīng)的體外刺激增殖活性也隨之降低.進一步的研究發(fā)現(xiàn),這一段序列對于HPO的受體結(jié)合性并不是必需的,當HPO 1~20氨基酸殘基缺失后,其受體結(jié)合活性會有所提高.(2)參與組成HPO錐形結(jié)構(gòu)中α5螺旋的106~115位氨基酸殘基對于HPO的受體結(jié)合活性是必需的,如果缺失這一段序列,會使其受體結(jié)合活性完全前失,其體外刺激增殖活性也大大下降.(3)參與組成HPO錐形結(jié)構(gòu)C-末端環(huán)狀結(jié)構(gòu)

3、的116~125位氨基酸殘基對于HPO的受體結(jié)合活性具有一定的抑制作用,如果缺失這一段序列,其受體結(jié)合活性會顯著提高.(4)HPO發(fā)揮體外刺激增殖活性與其相應(yīng)的受體結(jié)合活性是密切相關(guān)的.如果HPO缺失體的受體結(jié)合活性下降,相應(yīng)的體外刺激活性也隨之降低.但相對于HPO△C10的研究發(fā)現(xiàn),它雖然具有很高的受體結(jié)合活性,但其體外刺激活性與HPO相比,卻下降了17.19﹪.這說明HPO發(fā)揮體外刺激增殖活性是通過HPO特異性受體來介導的,但HPO