肝細(xì)胞生成素HPO205與肝癌細(xì)胞惡性表型關(guān)系的研究.pdf

1、軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士后研究工作報告肝細(xì)胞生成素(HP0205)與肝癌細(xì)胞惡性表型關(guān)系的研究博士后岳培彬合作導(dǎo)師楊曉明研究員流動站(一級學(xué)科)生物學(xué)專業(yè)(二級學(xué)科)生物化學(xué)與分子生物學(xué)工作起止時間：2002年11月2004年12月軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院2004年12月本課題受國家“973”項目基金(2002cB513100)，國家自然科學(xué)基金(30371596)資助軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士后出站報告肝細(xì)胞生成素皿P0205)與肝癌細(xì)胞惡性表型關(guān)系的研究摘

2、要HPO屬于ERv／ALR家族。該家族是一類依賴FAD的巰基氧化酶，高度保守的特征性CXXcmotjf是其巰基氧化酶活性所必須的。人HPO基因有兩種轉(zhuǎn)錄形式，分別編碼125個和205個氨基酸殘基，稱為HP0和HP0205。HPO在胞漿和胞核中均有分布，并能以自分泌方式分泌到細(xì)胞外。據(jù)報道，HPO／ALR是一種肝源性生長因子，原代培養(yǎng)的大鼠肝細(xì)胞和人肝癌細(xì)胞表面都存在其特異性受體，且體外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞系中存在刺激自主性生長的HPO白分泌循

3、環(huán)，阻斷該循環(huán)可抑制肝癌細(xì)胞生長。HPO在再生肝細(xì)胞漿和血漿中呈特異性高水平表達(dá)，因此研究認(rèn)為，HPO的主要功能是參與肝再生調(diào)控。HP0205的c端125個氨基酸殘基與HPO完全相同，但N端比HPO多了80個氨基酸殘基，且氨基端含有線粒體定位信號。HP0205定位于線粒體膜間隙，不能分泌到細(xì)胞外。小鼠精子發(fā)生早期階段，精原細(xì)胞和初級精母細(xì)胞中線粒體形式ALR呈高水平表達(dá)，提示它可能與精子發(fā)生過程中線粒體形態(tài)和功能的改變有關(guān)。HP0205

4、在多種肝癌細(xì)胞系中均表達(dá)，并且在高表達(dá)c—Met與Ets1、高侵襲性生長的HepG2和HLE肝癌細(xì)胞中高表達(dá)，麗在低侵襲性生長的sMMc7721和Bel7402肝癌細(xì)胞中低水平表達(dá)，這提示HP0205可能與肝癌細(xì)胞的侵襲性生長有關(guān)。因此，本課題首次探討了HP0205與肝癌細(xì)胞惡性表型的關(guān)系及可能的機制。為了研究HP0205巰基氧化酶活性與肝癌細(xì)胞惡性表型的關(guān)聯(lián)，我們構(gòu)建了HP0205CxxCmotif第145位Cys殘基C—S突變體HP

5、0205C145S，并建立了穩(wěn)定表達(dá)不同水平HP0205或其突變體的sMMc772l細(xì)胞株。結(jié)果顯示，過表達(dá)HP0205可明顯促進(jìn)SMMC772l細(xì)胞的生長和運動，使細(xì)胞對HGF誘導(dǎo)離散的反應(yīng)性增強，使細(xì)胞抗輻射誘導(dǎo)凋亡的能力明顯增強。但HP0205巰基氧化酶活性(SOX)缺失體HP0205。1455卻失去了這些功能。這提示，HP0205促進(jìn)SMMC772l細(xì)胞生長和存活依賴于sOx的活性。HP0205能以依賴SOX活性的方式活化sMM