過(guò)氧化物酶增殖物激活受體γ抑制鼠肝臟部分缺血再灌注中TLR4表達(dá)及其機(jī)制.pdf

1、第一部分：羅格列酮抑制鼠肝臟缺血再灌注中TLR4基因表達(dá)的時(shí)序性變化及意義目的：通過(guò)研究過(guò)氧化物酶增殖物激活受體γ（peroxisome proliferater-activated receptorγ，PPARγ）激動(dòng)劑羅格列酮抑制TLR4基因在小鼠肝臟缺血再灌注損傷（ischemia/reperfusion injury，IRI）中的動(dòng)態(tài)時(shí)序性表達(dá),探討羅格列酮對(duì)TLR4基因表達(dá)的抑制與肝功能損傷間的關(guān)系。 方法：以BALB

2、/c小鼠復(fù)制肝臟部分IRI模型，動(dòng)物隨機(jī)分為羅格列酮+IRI組、對(duì)照組(二甲基亞砜+IRI組)及假手術(shù)組。在缺血再灌注的0、2、4及6小時(shí)采集標(biāo)本。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法觀測(cè)在小鼠肝臟部分缺血再灌注損傷模型中羅格列酮抑制TLR4基因的動(dòng)態(tài)時(shí)序性表達(dá)變化,同時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)門(mén)靜脈血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase,ALT）水平

3、。 結(jié)果：鼠肝臟左中葉缺血1 h 后,不同的再灌注時(shí)間0h,2h,4h,6h中羅格列酮+IRI組缺血肝葉TLR4基因表達(dá)、血清TNF-α及ALT水平較二甲基亞砜+IRI組中均明顯下調(diào)(P<0.05)。再灌注4小時(shí)二甲基亞砜+IRI組缺血肝葉的TLR4基因表達(dá)最高，與同組中不同的再灌注時(shí)間0h,2h，6h差異顯著(P<0.05)。再灌注4小時(shí)羅格列酮+IRI組缺血肝葉TLR4基因表達(dá)最低,與同組中不同的再灌注時(shí)間0h,2h，6h差

4、異顯著(P<0.05)。 結(jié)論：小鼠肝臟部分缺血再灌注模型中羅格列酮抑制TLR4基因表達(dá)并減輕肝臟損傷。羅格列酮影響最為顯著的時(shí)間點(diǎn)是復(fù)灌后4小時(shí)。 第二部分：PPARγ抑制鼠肝臟部分缺血再灌注中TLR4表達(dá)及其機(jī)制 目的:為深入探討肝臟缺血再灌注損傷機(jī)制，尋找肝缺血再灌注損傷治療的新靶點(diǎn),我們觀察在小鼠肝臟部分IRI中PPARγ及TLR4表達(dá)及門(mén)靜脈血清TNF-α、白細(xì)胞介素10（interleukin-10，

5、IL-10）和ALT水平的變化,研究在此過(guò)程中羅格列酮激活的PPARγ對(duì)TLR4表達(dá)改變及與IL-10相互作用機(jī)制及其生物學(xué)效應(yīng)。 方法：以BALB/c小鼠制作肝臟部分IRI模型。小鼠隨機(jī)分為五組: 羅格列酮+IRI組、羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組、對(duì)照組(二甲基亞砜+IRI組)、假手術(shù)組。復(fù)灌4小時(shí)處死動(dòng)物取材。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法觀測(cè)PPARγ、TLR4基因在各組小鼠肝臟部分缺血再灌注損傷過(guò)程中

6、的表達(dá)變化,同時(shí)檢測(cè)血漿TNF-α、IL-10及ALT水平，行肝臟的病理切片（HE染色）檢查。 結(jié)果：結(jié)果顯示羅格列酮+IRI組PPARγ表達(dá)較羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組及對(duì)照組顯著增高(P<0.05)。羅格列酮+IRI組的TLR4表達(dá)較羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組及對(duì)照組顯著減弱(P<0.05)。羅格列酮+IRI組血清IL-10水平較羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+

7、IRI組及對(duì)照組顯著增高(P<0.05)。羅格列酮+IRI組血清TNF –α及ALT水平較羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組及對(duì)照組顯著降低(P<0.05),均高于假手術(shù)組(P<0.05)。病理切片顯示羅格列酮+IRI組中肝細(xì)胞輕中度水腫，羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組及對(duì)照組中肝細(xì)胞重度水腫，小葉結(jié)構(gòu)破壞明顯。 結(jié)論：鼠肝臟IRI中羅格列酮激活PPAR-γ并上調(diào)IL-10水平,抑制TLR