JWA調(diào)節(jié)MNNG誘導(dǎo)的HBE細(xì)胞凋亡和惡性轉(zhuǎn)化.pdf

1、本課題組近年來先后證實JWA基因較廣泛地參與多種化學(xué)藥物(如ATRA，TPA，Ara-C，As2O3和hemin)誘導(dǎo)的白血病原代細(xì)胞和細(xì)胞株的分化、成熟和凋亡調(diào)節(jié)，可能細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)分化多種信號通路的共同信號分子。還有實驗證據(jù)顯示，JWA是新的活躍的環(huán)境應(yīng)答基因，積極參與細(xì)胞應(yīng)答環(huán)境熱應(yīng)激、氧化應(yīng)激等導(dǎo)致的DNA損傷與修復(fù)過程。 細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化是細(xì)胞分化成熟的逆過程，JwA基因參與調(diào)節(jié)多種白血病腫瘤細(xì)胞的分化成熟過程，是否與細(xì)胞的惡

2、性轉(zhuǎn)化過程有關(guān)呢?本課題選用經(jīng)典的烷化劑甲基硝基亞硝基胍(MNNG)，一種環(huán)境中廣泛存在并且已經(jīng)被確認(rèn)的強(qiáng)化學(xué)致癌物，MNNG可導(dǎo)致接觸細(xì)胞產(chǎn)生嚴(yán)重的DNA損傷，已經(jīng)被常用作動物誘癌模型和細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化模型。本研究中我們建立了MNNG誘導(dǎo)人支氣管上皮(HBE)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的實驗?zāi)Ｐ?，并在此基礎(chǔ)上研究在細(xì)胞凋亡和惡性轉(zhuǎn)化過程中JWA基因的作用。 1.MNNG誘導(dǎo)HBE細(xì)胞發(fā)生凋亡用1、2、4、8和16μg/mlMNNG處理

3、后觀察HBE細(xì)胞24h，其生長抑制率分別為1.4﹪、8.3﹪、32.2﹪、50.3﹪、92.7﹪。 2.MNNG誘導(dǎo)人支氣管上皮細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化為進(jìn)一步探討JWA是否參與調(diào)節(jié)MNNG誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過程，本研究首先構(gòu)建JWA高表達(dá)、JWA反義表達(dá)和相應(yīng)的載體對照，并用這些表達(dá)或?qū)φ蛰d體轉(zhuǎn)染HBE細(xì)胞后再用G418穩(wěn)定篩選相應(yīng)的HBE細(xì)胞株。 3.JWA應(yīng)答MNNG引起HBE細(xì)胞凋亡和惡性轉(zhuǎn)化的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)為了解JWA基因是否