肝移植供肝低溫保存后細(xì)胞凋亡現(xiàn)象的觀察.pdf

1、研究背景及目的：自1963年starzal成功實(shí)施第一例人體肝移植以來，隨著肝移植手術(shù)技術(shù)的完善，環(huán)孢霉素、FK-506以及UW液的臨床應(yīng)用，肝移植術(shù)后的長期生存率不斷提高，肝移植已成為治療各種終末期肝硬化性疾病、肝臟惡性腫瘤、先天性代謝性疾病以及各種原因引起的急慢性肝功能衰竭的一種有效手段。但是，目前仍有很多因素制約著肝移植的臨床效果，其中供體質(zhì)量作為肝臟移植成功的關(guān)鍵因素，已受到愈來愈多的關(guān)注。檢驗(yàn)供體質(zhì)量最客觀的指標(biāo)是“零點(diǎn)肝活檢

2、”。本實(shí)驗(yàn)的目的是采取零點(diǎn)肝活檢的方式觀察供肝低溫保存后細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。 方法：采用原位雙通路灌注快速供肝切取技術(shù)，獲取供肝30例。0-4度UW液低溫保存，根據(jù)保存時(shí)間不同分為3組。在低溫保存末期于供肝左內(nèi)葉前緣切取0．5<'*>0．5<'*>0．5 cm大小組織，將取下的肝組織4﹪甲醛固定，石蠟包埋，做連續(xù)切片，將制成的切片按末端脫氧核苷酸移換酶介導(dǎo)的脫氧尿苷三磷酸缺口末端標(biāo)記術(shù)(terminal deoxynucleotidy

3、l transferase mediated LJTP-FITC nick endlabeling,TUNEL)觀察細(xì)胞凋亡現(xiàn)象，并對凋亡細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算凋亡指數(shù)，了解凋亡程度與低溫保存時(shí)間的關(guān)系。 結(jié)果(一)：30例移植肝均切取完整，無供體及血管副損傷，供體獲得良好灌注，移植術(shù)后肝功能恢復(fù)順利，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)于移植術(shù)后30天左右降至正常。 結(jié)果(二)：三組標(biāo)本陽性細(xì)胞數(shù)分別為：1．20±0．82，4．06±1．