不同預處理對大鼠肝移植供肝保護作用的探討.pdf

1、缺血預處理是短期缺血應激使機體組織對隨后更長時間缺血再灌注損傷產(chǎn)生明顯保護作用的一種適應性機制，缺血預處理的保護作用具有呈初始階段、延遲階段雙峰表現(xiàn)的特點。熱休克預處理同樣可以為組織提供保護作用，但僅具有延遲階段的保護作用。研究預處理的機制是為了給肝移植、肝臟手術等提供更好的肝臟保護方法。目前預處理的機制尚未徹底闡明，爭論較多。 目的： 本研究通過應用缺血、加熱等多種手段對大鼠供肝進行移植術前的預處理，比較各種預處理方法

2、對大鼠肝移植供肝缺血再灌注損傷的保護作用，并在不同預處理方法中的應用一氧化氮合酶(NOS)抑制劑N-]E硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)，從而探討預處理對肝臟的保護機制。 第一部分不同干預手段對大鼠供肝缺血損傷的保護作用 目的：建立多種對大鼠肝臟的預處理模型，比較各種預處理方法對大鼠肝臟的保護效果。 方法：將SD大鼠48只，隨機分為六組：全肝缺血預處理組、半肝缺血預處理組、肝外臟器(脾臟)缺血預處理組、熱休克

3、預處理組、熱休克+半肝缺血預處理組及假手術對照組，對大鼠肝臟進行處理，肝臟離體保存，再檢測離體肝臟灌洗液的ALT水平及肝臟的形態(tài)學變化。 結(jié)果：半肝缺血預處理組、熱休克預處理組的供肝灌洗液中的ALT水平明顯低于對照組(P<0．05)；熱休克+半肝缺血預處理組供肝灌洗液中的ALT水平也低于對照組，卻明顯高于前面兩組(P<0.05)。全肝缺血預處理組、脾臟缺血預處理組的供肝灌洗液中的ALT水平也低于對照組(P<0．05)。肝臟的形態(tài)

4、學變化提示類似的結(jié)果。 結(jié)論：各種預處理均起到了保護大鼠肝臟的作用；半肝缺血預處理和熱休克預處理對大鼠肝臟的保護作用最明顯；將肝臟缺血及熱休克預處理聯(lián)合處理大鼠，其保護作用明顯弱于單獨缺血或單獨熱休克的預處理. 第二部分大鼠模擬肝移植模型的制備及其價值的研究 目的：制備大鼠原位肝移植和模擬原位肝移植的方法；對兩種方法進行比較。 方法：建立大鼠原位肝移植模型(改良雙套管法)；建立大鼠模擬肝移植模型(鉗夾法)

5、；比較兩種模型在制備、術后肝功能和存活率之間的差異。 結(jié)果：改良雙套管法的大鼠原位肝移植模型的建立需要大量的訓練；大鼠模擬原位肝移植模型的方法比較簡單；后者在操作掌握度和術后肝功能和存活率等方面優(yōu)于前者。 結(jié)論：大鼠模擬肝移植模型的方法操作簡單，干擾因素少，可以在一些研究中替代原位肝移植模型。 第三部分不同肝臟預處理對大鼠肝移植中供肝保護作用的比較 目的：通過大鼠模擬肝移植的模型，比較各種預處理對移植肝的

6、保護作用。 方法：將SD大鼠50只，隨機分為五組：肝臟缺血預處理組、脾臟缺血預處理組、熱休克預處理組、熱休克+缺血預處理組及手術對照組，分別進行肝臟預處理后進行模擬原位肝移植術，術后檢測膽汁流量，術后24小時檢測血清ALT、AST、ALP和肝臟形態(tài)學變化。 結(jié)果：肝臟缺血預處理組、熱休克預處理組的移植后膽汁分泌量多于對照組，血清ALT、AST水平明顯低于對照組(P<0．05)；熱休克+缺血預處理組的血清ALT水平低于對照

7、組(P<0．05)，膽汁分泌量及血清AST與對照組沒有顯著差異；脾臟缺血的膽汁分泌量多于對照組，血清ALT水平低于對照組(P<0．05)。 結(jié)論：肝臟缺血預處理初始階段保護作用最明顯，將缺血及熱休克預處理兩種方法聯(lián)合處理大鼠時，其保護作用弱于單獨缺血或單獨熱休克的預處理方法；脾臟缺血預處理也具有保護肝臟的作用。 第四部分一氧化氮合酶(NOS)抑制劑N．亞硝基．L前氨酸甲酯(L-NAME)對不同預處理在大鼠肝移植供肝保護作

8、用中的影響 目的：進行各種預處理前應用一氧化氮合酶(NOS)抑制劑N．亞硝基．L．精氨酸甲酯(L-NAME)，觀測其對肝移植供肝的影響。 方法：將SD大鼠30只，隨機分為三組：肝臟缺血預處理組、熱休克預處理組及熱休克+缺血預處理組，分別在術前注射L-NAME，進行相應肝臟預處理后行模擬肝移植術，術后檢測膽汁流量，術后24小時檢測血清ALT、AST、ALP和肝臟形態(tài)學變化。 結(jié)果：注射L-NAME后，肝臟缺血預處理