局部晚期宮頸癌新輔助化療療效的評價(jià)及其與DNA修復(fù)基因關(guān)系的研究.pdf

1、背景 化療是腫瘤最主要的治療手段之一，由于腫瘤本身以及個(gè)體間異質(zhì)性的存在，不同個(gè)體之間化療療效仍存在很大的差異，尋求療效預(yù)測的指標(biāo)是開展個(gè)體化藥物治療的基礎(chǔ)。宮頸癌的NACT均采用鉑類為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療。鉑類藥物的耐受有許多相關(guān)機(jī)制，其中DNA修復(fù)能力的改變是最主要的機(jī)制之一。 人類X射線交錯(cuò)互補(bǔ)基因1(X-ray repair cross complementing gene 1，XRCC1)和著色性干皮病基因組D(Xe

2、roderma pigmentostosum pomplementary groupD，XPD)是最主要的DNA修復(fù)基因，分別通過堿基切除修復(fù)(base excision repair，BER)和核苷酸切除修復(fù)(nucleotide excision repair，NER)方式參與DNA 的損傷修復(fù)，其蛋白的表達(dá)可能與鉑類藥物耐受間存在密切的關(guān)系，但在宮頸癌NACT中，兩者的表達(dá)狀況與NACT療效間的關(guān)系仍未見相關(guān)的研究。近代藥理遺傳學(xué)

3、研究表明，遺傳多態(tài)性，特別是單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)是影響藥物療效個(gè)體差異的重要原因之一。XRCC1基因有3個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，分別位于密碼子194(Arg-Trp)，280(Arg-His)和399(Arg-Gln)位點(diǎn)，XRCC1的SNP可能改變其對DNA損傷的修復(fù)能力，已成為研究腫瘤易感性及對腫瘤治療反應(yīng)性的遺傳性分子指標(biāo)。已有研究顯示XRCC1的SNP與多種腫瘤的發(fā)生有關(guān)，

4、也與肺小細(xì)胞肺癌、大腸癌等腫瘤鉑類藥物化療的敏感性存在相關(guān)性，但在局部晚期宮頸癌中的NACT中，有關(guān)XRCC1的SNP與化療療效間關(guān)系的研究仍十分少見。 本研究回顧性分析我們治療的局部晚期宮頸癌NACT的臨床療效，分析影響其療效的可能臨床病理因素，評價(jià)療效與長期生存的關(guān)系；并進(jìn)一步從XRCC1、XPD蛋白表達(dá)水平以及XRCC1 SNP的角度分析其與療效的關(guān)系，以期揭示預(yù)測局部晚期宮頸癌NACT療效的可能指標(biāo)，為個(gè)體化化療提供依據(jù)

5、。 第一部分： 局部晚期宮頸癌新輔助化療價(jià)值的評價(jià)研究 目的： 評價(jià)局部晚期宮頸癌新輔助化療的近期療效及影響療效的臨床相關(guān)因素，分析療效與長期生存的關(guān)系。 材料與方法： 回顧性分析1999.6-2007.6在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院接受以鉑類為基礎(chǔ)的新輔助化療的局部腫瘤直徑≥4cm的Ⅰb-Ⅱa期局部晚期宮頸癌109例。分析化療的近期療效，選取年齡、臨床分期、分化、組織類型、治療前腫瘤最

6、大直徑、化療方案、療程數(shù)、治療前血紅蛋白等8個(gè)臨床參數(shù)，分析其與化療療效的相關(guān)性，分析不同化療療效者總生存率及無瘤生存率。 結(jié)果： 1.109例患者中，化療有效者為85例(CR 3例，PR 82例)，無效者24例，總有效率為77.9％。 2.化療療效與局部晚期宮頸癌組織類型有關(guān)，鱗癌有效率為82.3％(79/96)，腺癌為46.2％(6/13)，鱗癌有效率顯著高于腺癌(X2=9.342，P=0.002)：化療療效

7、與年齡、臨床分期、分化、治療前腫瘤最大直徑、化療方案、療程數(shù)、治療前血紅蛋白等其他因素?zé)o顯著相關(guān)性(P>0.05)。 3.化療后接受手術(shù)的102例中，化療有效者手術(shù)后盆腔淋巴結(jié)陽性率為4.70％(4/85)，顯著低于化療無效者的23.53％(4/17)，兩者差異有顯著性(X2=6.85，P=0.008)；新輔助化療有效者宮頸間質(zhì)浸潤≥外1/3的比率顯著低于無效者(15.29％VS 52.94％，X2=11.87，P=0.012)

8、：宮旁脈管陽性率兩組間無顯著性差異(X2=2.06，P=0.153)。 4.109例中隨訪資料完整者為88例，總2年生存率為98.4％，5年生存率為86.5％；采用Log Rank方法比較生存，顯示新輔助化療有效組至隨訪結(jié)束全部存活，而化療無效組1年生存率為92.9％，2年生存率為59.7％，化療有效者生存率顯著高于無效者(chi-square=7.299，P=0.007)：無瘤生存率比較顯示：化療有效組至隨訪結(jié)束均無瘤生存，而

9、無效組1年無瘤生存率為88.9％，2年無瘤生存率為57.3％，化療有效者無瘤生存率顯著高于無效者(chi-square=6.814，P=0.009)。 結(jié)論： 1.NACT有效者可降低手術(shù)后盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮頸外1/3間質(zhì)浸潤和手術(shù)后需輔助治療的比率，提示NACT可消除或抑制微小轉(zhuǎn)移灶、改善腫瘤的局部控制。 2.NACT有效的局部晚期宮頸癌患者應(yīng)選擇手術(shù)，并可提高生存率。 第二部分　　目的： 探

10、討XRCC1、XPD蛋白表達(dá)與局部晚期宮頸癌新輔助化療療效間的相關(guān)性，旨在尋找預(yù)示化療療效的指標(biāo)。 材料和方法： 選取1996.6-2007.6在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院接受以鉑類為基礎(chǔ)的新輔助化療、臨床病理資料完整的腫瘤直徑≥4cm的Ⅰ b2-Ⅱ a期子宮頸癌共99例，采用免疫組化法檢測治療前宮頸癌組織中XRCC1，XPD的蛋白表達(dá)，分析蛋白表達(dá)與新輔助化療療效及臨床病理參數(shù)間的關(guān)系。 結(jié)果： 1.

11、XRCC1蛋白的表達(dá)在化療無效組顯著高于化療有效組(2.99±0.38 VS1.94±0.28，t=13.64，P=0.008)。 2.XPD蛋白的表達(dá)在化療無效組顯著高于化療有效組(2.93+0.29 VS 1.78±0.39，t=11.89，P=0.007)。 3.XRCC1的表達(dá)腺癌組織中顯著高于鱗癌(2.46+0.77 VS 2.10+0.45，t=-2.46，P=0.02)；盆腔淋巴結(jié)陽性者顯著高于陰性者(2.

12、52+0.77 VS2.07±0.44，t=-3.00，P=0.01)。宮頸間質(zhì)浸潤≥外1/3者顯著高于<外1/3浸潤者(2.45+0.60 VS 2.01±0.40，t=-4.14，P=0.01)；而XRCCl的表達(dá)與患者年齡、臨床分期、宮旁脈管是否受累，分化、腫瘤直徑等因素?zé)o關(guān)(P>0.05)。 4.XPD蛋白表達(dá)患者年齡≤35歲者組織中顯著高于>35歲者(2.23±0.61 VS1.92±0.57，t=2.27，P=0.0

13、3)：腺癌顯著高于鱗癌(2.44±0.72 VS 1.93±0.54，t=-3.01，P=0.01)：淋巴結(jié)陽性者顯著高于陰性者(2.42±0.71 VS 1.93±0.55，t=-2.83，P=0.01)；宮頸間質(zhì)浸潤≥外1/3者顯著高于<外1/3(2.23±0.72 VS1.89±0.50，t=-2.56，P=0.01)；XPD蛋白表達(dá)與臨床分期、宮旁脈管是否受累，細(xì)胞分化及腫瘤直徑等均無顯著相關(guān)性(P>0.05)。 5.X

14、RCC1蛋白與XPD蛋白表達(dá)間具有正相關(guān)性(r=0.643，p=0.001)。 結(jié)論： 1.局部晚期宮頸癌NACT有效者組織中XRCCl、XPD蛋白的表達(dá)顯著低于NACT無效者，提示XRCCl、XPD蛋白的高表達(dá)與鉑類為基礎(chǔ)的NACT化療的耐藥有關(guān)。 2.XRCCl、XPD蛋白表達(dá)水平的檢測可作為預(yù)示局部晚期宮頸癌NACT療效的指標(biāo)之一。 第三部分：　　目的： 探討XRCCl單核苷酸多態(tài)性與局部

15、晚期宮頸癌新輔助化療療效的關(guān)系，旨在尋找預(yù)測新輔助化療療效的遺傳性分子指標(biāo)。 材料與方法： 選取1999.6-2007.6在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院婦產(chǎn)科醫(yī)院接受新輔助化療并有外周血樣的局部晚期宮頸癌病例70例，采用MAMA—PCR方法檢測外周血中XRCC1的codon 194、399位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性，采用免疫組化法檢測治療前宮頸癌組織中XRCC1蛋白的表達(dá)，分析不同基因型間新輔助化療的療效及與XRCC1蛋白表達(dá)的關(guān)系。

16、 結(jié)果： 1.XRCCl codon 194位點(diǎn)的基因型(Arg/Arg，Arg/TrP，Trp/TrP)與新輔助化療療效無顯著性相關(guān)(X2=1.243，P=0.07)；不同基因型間XRCC1蛋白表達(dá)無顯著性差異(F=1.186，P=0.103)。 2.XRCC1 codon 399位點(diǎn)不同的基因型間(Arg/Arg，Arg/Gln， Gln/Gln)新輔助化療療效有顯著性差異(X2=2.283，P=0.03)，攜帶至

17、少一個(gè)Gln等位基因者，其化療失敗的風(fēng)險(xiǎn)為基因型為Arg/Arg者的3.254倍(95％CI 0.708～14.951)；不同基因型間XRCCl蛋白的表達(dá)也有顯著性差異(F=15.915，p<0.001)。至少攜帶一個(gè)Gln等位基因者，其XRCC1蛋白表達(dá)水平顯著高于基因型為Arg/Arg者(F=2.699，P=0.009)。 結(jié)論： 在局部晚期宮頸癌NACT中，XRCC1 codon 399位點(diǎn)攜帶至少一個(gè)Gln等位基