MKK-4、TIMP-1和MMP-9在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)及其與侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系.pdf

1、[目的] 觀察絲裂原活化蛋白激酶激酶4(MKK-4)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)，分析其表達(dá)與原發(fā)性肝癌臨床病理特征(組織分化、大小、分期、細(xì)胞來源和侵襲轉(zhuǎn)移)和生存預(yù)后的關(guān)系，探討三者在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用及MKK-4對TIMP-1和MMP-9表達(dá)的調(diào)節(jié)作用，為原發(fā)性肝癌的基因治療提供理論依據(jù)和判斷預(yù)后指標(biāo)。 [方法] 1.篩選臨床資料完整的肝癌

2、患者術(shù)后的石蠟標(biāo)本59例，包括肝細(xì)胞性肝癌47例，膽管細(xì)胞性肝癌12例。其中未發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移肝癌29例，已發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移肝癌30例；分化好的21例，分化差的38例；小于5cm的16例，大于5cm的43例；Ⅰ期9例，Ⅱ期21例，Ⅲ期29例。以20例正常肝組織石蠟標(biāo)本為正常對照。應(yīng)用免疫組化技術(shù)即用型二步法(非生物素)，檢測MMP-9及TIMP-1蛋白質(zhì)的表達(dá)；對48例肝癌(肝細(xì)胞性肝癌36例，膽管細(xì)胞性肝癌12例)患者進(jìn)行隨訪。 2.

3、收集肝癌患者新鮮組織標(biāo)本34例，其中肝細(xì)胞性肝癌32例，膽管細(xì)胞性肝癌2例。未發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移肝癌15例，已發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移肝癌19例；分化好的20例，分化差的14例；小于5cm的14例，大于5cm的20例；Ⅰ期7例，Ⅱ期16例，Ⅲ期11例。12例新鮮肝組織標(biāo)本作為正常對照。采用RT-PCR檢測上述標(biāo)本中MKK-4、MMP-9及TIMP-1的mRNA的表達(dá)水平。 上述病例術(shù)前均未行任何抗腫瘤治療。上述標(biāo)本均經(jīng)病理確診。對上述病例按腫瘤侵

4、襲轉(zhuǎn)移、腫瘤細(xì)胞來源、分化、大小、分期情況進(jìn)行分類。 [結(jié)果] 1.癌組織中MKK-4mRNA表達(dá)明顯低于癌旁組織和正常組織(P＜0.01)；雖然侵襲轉(zhuǎn)移組和Ⅲ期肝癌中MKK-4mRNA表達(dá)明顯低于無侵襲轉(zhuǎn)移組和Ⅰ期者，但其表達(dá)與腫瘤大小和分化程度無關(guān)。 2.癌組織中TIMP-1mRNA和蛋白表達(dá)明顯低于癌旁組織和正常組織(P＜0.01)，其中尤以侵襲轉(zhuǎn)移組最明顯，但其表達(dá)與腫瘤大小、組織分化程度、分期無關(guān)。

5、 3.癌組織中MMP-9mRNA和蛋白表達(dá)明顯高于癌旁組織和正常組織(P＜0.01)；盡管侵襲轉(zhuǎn)移組和Ⅱ、Ⅲ期肝癌中MMP-9表達(dá)明顯高于無侵襲轉(zhuǎn)移組和Ⅰ期者，但其表達(dá)與腫瘤大小和組織分化程度無關(guān)。 4.MKK-4與MMP-9mRNA、MMP-9與TIMP-1mRNA和蛋白表達(dá)均呈顯著負(fù)相關(guān)(P＜0.01)，而MKK-4與TIMP-1mRNA表達(dá)呈顯著正相關(guān)(P＜0.01)。 5.肝癌患者的生存分析發(fā)現(xiàn)，MMP-9高

6、表達(dá)和(或)TIMP-1低表達(dá)與生存率較低呈顯著相關(guān)(P＜0.05)，膽管細(xì)胞性肝癌患者的生存率較肝細(xì)胞性肝癌患者的生存率低(P＜0.05)。 [結(jié)論] 1.MKK-4mRNA表達(dá)下調(diào)與肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，推測MKK-4表達(dá)下調(diào)可能通過增加MMP-9表達(dá)和(或)減少TIMP-1表達(dá)來促進(jìn)肝癌侵襲轉(zhuǎn)移。 2.MMP-9表達(dá)上調(diào)和TIMP-1表達(dá)下調(diào)與肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移和生存率較低有關(guān)，二者的平衡失調(diào)促進(jìn)了肝癌侵襲轉(zhuǎn)移，