共同性斜視弱側眼肌的組織形態(tài)及超微結構研究.pdf

1、共同性斜視已成為日益嚴重的健康問題,其發(fā)病機制的研究、治療時機和治療方案的探討一直是眼科學的重要課題.共同性斜視的病因目前尚不明確,多數(shù)文獻支持神經(jīng)支配因素理論,即"傳出原理",認為眼位信息是由中樞神經(jīng)系統(tǒng)提供,經(jīng)傳出神經(jīng)傳至眼外肌;近年來有學者提出傳入原理,即眼位信息經(jīng)眼外肌本體感受器三叉神經(jīng)眼支傳至中樞神經(jīng)系統(tǒng),再由傳出神經(jīng)傳至眼外肌.目前的研究均表明斜視眼弱側眼肌確實發(fā)生了病理學改變,由于眼肌運動不僅取決于眼肌內部的細微結構正常及

2、神經(jīng)支配的共同完成,同時維持眼平衡及保持眼球正常位置也依靠正常眼肌纖維本身的肌張力和緊張度,病人肌纖維呈萎縮性改變,不能接受中樞的神經(jīng)沖動刺激使眼肌的興奮松弛,調整受到破壞,不能維持眼球的正常位置及建立雙眼視覺.這種肌纖維超微結構的改變與斜視時間長、矯治時間有較大的關系. 研究目的：通過對不同年齡組共同性斜視患者弱側眼外肌的光鏡和電鏡觀察,并測定光鏡下各年齡組肌纖維面積/膠原纖維面積的變化,探討共同性斜視的發(fā)病機理及手術時機的選

3、擇. 研究對象與方法 1. 研究對象 1.1斜視組本組共同性斜視患者50例,來自浙江大學醫(yī)學院附屬二院眼科中心和附屬兒童醫(yī)院眼科,其中男性28例,女性22例;共同性內斜24例,共同性外斜26例;年齡2-64歲;病程1-45年;斜視度30<'△>-90<'△>.所有斜視病例第一斜視角等于第二斜視角、無復視、無眼球運動障礙.排除麻痹性斜視及其他眼病、心肝腎等重大臟器疾病.按年齡分為三組:6歲及以下;6～12歲:12歲

4、以上. 1.2對照組本組12例因外傷而摘除眼球的非斜視患者,來自浙江大學醫(yī)學院附屬二院眼科中心和附屬兒童醫(yī)院眼科,其中男性7例,女性5例;年齡3-56歲.排除斜視及心肝腎等重大臟器疾病. 所有研究對象均隨機抽取.所有檢查均取得患者和家長的知情同意. 2. 研究方法 采用前瞻性設計,分組對比研究. 2.1眼科檢查:所有入選對象均行常規(guī)眼部檢查,包括視力、眼前段裂隙燈檢查、眼底、眼壓等檢查;屈光狀態(tài)檢

5、查;斜視?？茩z查,包括眼球運動,三棱鏡加遮蓋檢查眼位、同視機進行各診斷眼位的斜視角測定及雙眼單視功能檢查. 2.2實驗室檢查: 2.2.1標本的采集和制作所有斜視組均采集弱側眼肌即內直肌或外直肌.對照組采集內直肌和外直肌. 2.2.1.1光鏡的標本制作:將切下的眼外肌置10﹪福爾馬林溶液中固定,取材,用乙醇逐級脫水,用二甲苯透明,用石蠟浸蠟,包埋成蠟塊,每塊做橫切和縱切兩個切面,切片厚5 μ m,分別行HE染色和

6、Masson染色后用光鏡觀察. 2.2.1.2電鏡的標本制作:將切下的眼外肌立2.5﹪戊二醛固定,1周后,用磷酸鹽緩沖漂洗,經(jīng)1﹪餓酸固定2小時,丙酮逐級脫水后,包埋液包埋,超薄切片檸檬酸鉛染色,用H(Philips Tacnai 10,荷蘭)透射電鏡觀察. 2.2.2測定方法Masson染色選用縱切片,用病理圖文分析系統(tǒng)測定肌纖維面積和膠原纖維面積比. 2.3統(tǒng)計學分析計算所有統(tǒng)計數(shù)據(jù)使用SPSS13.0軟件包

7、計算,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示.單樣本的Kolmogorow-Smirnov檢驗正態(tài)分布.比較斜視組和對照組的特征差異采用獨立樣本的t檢驗和X2檢驗.比較三年齡組的特征差異采用Pearson檢驗和單因素的方差分析.比較共同性內斜和共同性外斜的差異采用獨立樣本的t檢驗.三組均數(shù)間兩兩比較采用LSD-t法.兩變量的相關分析應用Spearman等級相關進行分析. 研究成果： 1.光鏡結果HE染色示肌膜、細胞核呈藍色,肌纖維為粉紅

8、色,結締組織為淡紅色. Masson染色示胞核呈藍褐色,膠原纖維呈綠色,肌纖維、紅細胞和纖維素呈紅色.對照組表現(xiàn)為肌纖維排列整齊,肌纖維大小一致,肌細胞為圓形,肌漿呈粉紅色.斜視組弱側眼外肌均有不同程度的病理改變,主要表現(xiàn)為:肌纖維粗細不均,萎縮,排列疏松、紊亂,核內移,肌漿變性呈顆粒狀或出現(xiàn)空泡,肌結締組織增多,有的僅見極少量肌纖維,甚至僅見成熟的膠原纖維,這種改變隨年齡的增長而明顯不同. 2.共同性斜視弱側眼外肌電鏡結果肌纖

9、維減少,肌絲破壞,局灶性肌絲溶解,肌纖維玻璃樣變,肌纖維之間結締組織增生并形成寬窄不均的纖維條索將肌纖維分隔,間質成分增多,神經(jīng)纖維減少,細胞內結構變性,可見大量線粒體增生、聚集. 3.比較斜視組和對照組的年齡、性別無統(tǒng)計學差異(p>0.05).斜視組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.65783±0.057306,對照組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.186908±0.0595106,對照組明顯高于斜視組(P<0.01). 4

10、.比較三不同年齡組的性別、斜視性質、斜視程度等無統(tǒng)計學差異(p>0.05). 5.Masson染色中肌纖維面積/膠原纖維面積在不同年齡組的情況用單樣本的Kolmogrow-Smimov檢驗示各年齡組中的肌纖維面積/膠原纖維面積分布符合正態(tài)分布,≤6歲組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.242523±0.0628391,6-12歲組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.188544±0.0326772,>12歲組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.

11、151233±0.0464508.利用LSD檢驗三組之間兩兩比較,差異均有顯著性(P<0.05). 6.細胞面積/膠原纖維面積與不同年齡組的相關性分析對肌纖維面積/膠原纖維面積和不同年齡組進行Spearman等級相關分析,結果顯示年齡程度與肌纖維面積/膠原纖維面積呈負相關(r=-0.601,p<0.01). 7.共同性內斜與共同性外斜中肌纖維面積/膠原纖維面積比較用單樣本的Kolmogrow-Smirnov檢驗示兩組中的

12、肌細胞面積/膠原纖維面積分布符合正態(tài)分布,肌纖維面積/膠原纖維面積在共同性內斜視中為0.197233±0.0677980,共同性外斜視中為0.177377±0.0501567,采用Levene檢驗顯示肌纖維面積/膠原纖維面積方差齊(F=2.372,P=0.130),故采用T檢驗,差異無統(tǒng)計學意義(t=1.184,P>0.05). 研究結論： 1. 通過光鏡和電鏡的觀察發(fā)現(xiàn)共同性斜視的弱側眼外肌發(fā)生了病理性改變.且在不同的