Notch信號通路在同基因造血干-祖細胞移植誘導(dǎo)免疫耐受中的作用.pdf

1、器官移植是二十一世紀(jì)醫(yī)學(xué)研究的熱點問題，近些年來已經(jīng)取得了很大的進展。如何建立供體特異性的移植免疫耐受，從而避免因長期使用免疫抑制藥物而產(chǎn)生的問題，在器官移植領(lǐng)域的研究中倍受關(guān)注。在對于免疫耐受機制的研究過程中，研究者們發(fā)現(xiàn)，調(diào)節(jié)性T細胞是一類具有抑制免疫應(yīng)答功能的細胞亞群，對維持免疫應(yīng)答和免疫耐受之間的平衡起重要作用，大量增殖的調(diào)節(jié)性T細胞能夠誘導(dǎo)免疫耐受。Notch信號通路是現(xiàn)階段發(fā)育學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)等領(lǐng)域的研究熱點，對于多種組織

2、的發(fā)育、免疫系統(tǒng)細胞的生長分化、腫瘤發(fā)生等方面起著重要作用。關(guān)于Notch信號通路誘導(dǎo)器官移植免疫耐受方面的研究，國際上尚無文獻報道。
　　本實驗在已有的工作基礎(chǔ)上，進一步研究造血干細胞移植誘導(dǎo)免疫耐受的機制，通過對Notch信號通路中特異性配體Jagged2的表達檢測，研究Notch信號通路在造血干/祖細胞移植誘導(dǎo)免疫耐受過程中所起的作用。
　　目的：建立小鼠頸部異位心臟移植模型，研究Notch信號通路在同基因造血干/祖細

3、胞移植誘導(dǎo)免疫耐受過程中的作用，探索一種安全可靠的誘導(dǎo)特異性器官移植免疫耐受的可行方法。
　　方法：將實驗動物隨機分為4組：A、B組行造血祖細胞移植，其中B組應(yīng)用Notch信號特異性阻滯劑DAPT，C組行造血干細胞移植，D組單純行心臟移植。流式細胞術(shù)檢測Notch配體Jagged2在造血干/祖細胞中的表達。進行造血干/祖細胞移植后，建立小鼠頸部異位心臟移植模型，觀察心臟移植物的存活情況，繪制Kaplan-Meier生存曲線，比較各

4、組心臟移植物存活時間的差別。對移植心臟組織切片HE、Masson染色，比較各組病理學(xué)改變。流式細胞術(shù)檢測各組調(diào)節(jié)性T細胞的百分率，混合淋巴細胞反應(yīng)檢測誘導(dǎo)耐受的特異性及效能。
　　結(jié)果：
　　1．Jagged2+細胞在A、B組（造血祖細胞）的百分比分別為59.6±3.5、60.2±4.1，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，p>0.05；在C組（造血干細胞）的百分比為32.8±3.2，與A、B組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，p<0.05。
　

5、　2．Kaplan-Meier生存曲線顯示，各組間心臟移植物存活時間有顯著差異，A組有62.5％的移植物長期存活（存活時間超過100d），而其他各組無一例長期存活。
　　3．D組病理學(xué)改變?yōu)榧毙耘懦夥磻?yīng)，A、C組心臟移植物在1wk內(nèi)無明顯病理學(xué)改變。B組表現(xiàn)為心肌細胞腫大、炎性細胞浸潤增多。
　　4．流式細胞術(shù)顯示心臟移植后受體外周血調(diào)節(jié)性T細胞百分率逐漸升高，到第4wk達到最高，而后又降低，A組在各個時間點上的調(diào)節(jié)性T細胞