胃癌細胞VEGF-NRP-1自分泌途徑及臨床作用的探討.pdf

1、目的：對胃癌細胞VEGF/NRP-1自分泌途徑的分析，探明其啟動及效應的細胞信號途徑；分析阻斷VEGF/NRP-1自分泌途徑后胃癌細胞的生物學活性，探討其臨床治療的價值。 方法：以人胃癌細胞株SCG7901為研究對象。MTT法檢測12G5對細胞粘附Matrigel的抑制作用，篩選出剛出現(xiàn)抑制作用的最小濃度用于后續(xù)實驗；檢測12G5對SCG7901細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響，Transwell小室進行人工重組基底膜侵襲和運動實驗；臺

2、盼藍染色法檢測12G5對細胞增殖的影響；流式細胞術(shù)檢測12G5對細胞凋亡的影響；RT-PCR及Western blot檢測SCG7901細胞VEGF自分泌途徑因子的mRNA和蛋白的表達，12G5對CXCR4表達的影響。 結(jié)果：12G5可使人胃癌細胞株SCG7901對基底膜粘附能力下降，濃度為10ug/ml的12G5即可使胃癌細胞粘附能力抑制，與對照組相比具有顯著意義(P<0.01、)，且隨藥物濃度的增大和時間的延長出現(xiàn)粘附抑制增

3、強。胃癌細胞株對照組和實驗組侵襲遷移實驗穿膜細胞數(shù)分別為：121.7±5.51，54.3±9.07；140.3±6.03，62.0±11.53。胃癌細胞株SCG7901實驗組的侵襲遷移能力明顯低于對照組，有非常顯著性差異(P<0.01)。 12G5對人胃癌細胞株SCG7901有細胞增殖抑制作用，經(jīng)12G5處理SCG7901細胞后出現(xiàn)細胞生存率明顯低于對照組(P<0.01)，且隨時間的延長與對照組比較抑制增強。流式細胞儀檢測細胞的

4、凋亡率，實驗組與對照組比較，結(jié)果顯示實驗組的凋亡率明顯高于對照組，差異具有顯著性意義(P<0.01)。檢測結(jié)果顯示胃癌細胞株SCG7901存在VEGF165mRNA、NRP-1mRNA、CXCR4mRNA及蛋白的表達，12G5處理細胞后，實驗組的CXCR4mRNA及蛋白水平較對照組顯著下降(P<0.01)。 結(jié)論：抗CXCR4單克隆抗體12G5一方面可能通過下調(diào)CXCR4的表達減少了與其配體SDF-1的結(jié)合；另一方面可能直接阻斷