人參皂苷Rg1及人參總皂苷對PDGF-BB所致血管平滑肌細胞增殖周期的影響.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分、人參皂苷Rg1對PDGF-BB所致血管平滑肌細胞增殖周期的影響
　　 目的:研究人參皂苷Rg1( ginsenoside Rg1對血小板源性生長因子BB型( PDGF-BB)所致血管平滑肌細胞(VSMC)增殖周期的影響并探討其可能機制。
　　 方法:組織塊貼壁法培養(yǎng)SD大鼠胸主動脈VSMC， MTT比色法觀察Rg1(0.02mg/ml、0.06mg/ml、0.18mg/ml)對

2、PDGF-BB(25ng/ml)所致VSMC增殖的影響;流式細胞儀分析細胞增殖周期;一氧化氮(NO)測試盒測定細胞上清液中一氧化氮(NO)含量，并用放射免疫法測定VSMC中環(huán)鳥苷酸(cGMP)的水平;Real-time RT-PCR檢測VSMC中內皮型一氧化氮合酶(eNOS)、原癌基因c-fos和周期蛋白D1( CyclinD1) mRNA表達。
　　 結果:在正常細胞中加入0.18mg/ml Rg1不影響細胞的吸光度值及G0/

3、G1期、G2/M期、S期細胞比例(P>0.05)；PDGF-BB明顯升高吸光度值(P<0.01)，增加細胞周期中S期細胞比例，降低G0/G1期細胞比例(P<0.01)，降低VSMCs上清液中NO含量及VSMC中cGMP含量(P<0.01);PDGF-BB還增高c-fos和CyclinD1mRNA的表達，降低eNOS的表達(P<0.01)。加入Rg1(0.02mg/ml、0.06mg/ml、0.18mg/ml)可明顯抑制PDGF-BB誘導

4、的VSMC增殖，降低細胞周期中S期細胞比例，升高G0/G1期細胞比例，升高VSMCs上清液中NO含量及VSMC中cGMP含量，顯著下調PDGF所致的c-fos及CyclinD1mRNA高表達，而上調eNOSmRNA表達。
　　 結論:Rg1通過阻滯細胞增殖周期從G0/G1期向S期轉化而抑制PDGF-BB誘導的VSMC增殖;上述作用與其上調eNOS表達，升高NO和cGMP含量有關;其分子機制可能涉及c-fos及CyclinD1mR

5、NA表達下調。
　　 第二部分、人參總皂苷對PDGF-BB所致血管平滑肌細胞增殖周期的影響
　　 目的:研究人參總皂苷( totel ginsenosides,TG)對血小板源性生長因子BB型(PDGF-BB)所致血管平滑肌細胞(VSMC)增殖周期的影響并探討其可能的機制。
　　 方法:組織塊貼壁法培養(yǎng)SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞，MTT比色法觀察TG(0.01mg/ml、0.03mg/ml、0.10mg/ml)對

6、PDGF-BB(25ng/ml)所致的VSMC增殖的影響;流式細胞儀分析細胞增殖周期;Real-time RT-PCR檢測VSMC中內皮型一氧化氮合酶(eNOS)、周期蛋白依賴性蛋白激酶抑制因子p27(KIP1)、原癌基因c-fos、周期蛋白D1(CyclinD1) mRNA的表達。
　　 結果:在正常細胞中加入TG0.10mg/ml不影響細胞的吸光度值及G0/G1期、G2/M期、S期細胞比例(P>0.05)；PDGF-BB可明

7、顯升高吸光度值(P<0.01)，增加S期細胞比例而降低G0/G1期細胞比例(P<0.01)，并顯著增加c-fos, CyclinD1 mRNA的表達，下調eNOS和p27(KIP1) mRNA的表達( P<0.01)。TG(0.01mg/ml、0.03mg/ml、0.10mg/ml)均明顯抑制PDGF-BB誘導的吸光度值升高(P<0.01)，降低S期細胞比例而升高G0/G1期細胞比例，顯著下調PDGF-BB所致的c-fos及Cyclin