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1、本研究以龍眼為材料,研究脫硫處理對(duì)熏硫龍眼的脫硫效果及貯藏生理的影響,利用轉(zhuǎn)錄組技術(shù)分析龍眼褐變前后及熏硫前后龍眼基因的表達(dá)的變化,并克隆了脂氧合酶cDNA全長(zhǎng)及探討LOX與龍眼果皮褐變的關(guān)系。
主要結(jié)果如下:
1.經(jīng)熏硫處理的龍眼果實(shí),果皮和果肉中的亞硫酸鹽含量隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而下降,果皮中的亞硫酸鹽含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于果肉。不同脫硫材料對(duì)熏硫龍眼脫硫效果差異顯著,其中,效果最好的為京百靈脫硫劑,其次為二氧化氯。
2、 2. SO2處理顯著改善龍眼果皮外觀色澤,延緩果實(shí)內(nèi)果皮褐變和延長(zhǎng)果實(shí)貯藏期。3%脫硫劑處理后,果實(shí)貯藏效果有所下降,外果皮色度值有所降低,內(nèi)果皮褐變指數(shù)升高,降低了SO2處理的保鮮效果。降低脫硫劑使用濃度和處理時(shí)間可有效降低了果實(shí)亞硫酸鹽含量并維持熏硫效果。
3.對(duì)照果實(shí)的SO活性和SO基因表達(dá)量維持于穩(wěn)定水平,熏硫處理后,SO活性和SO基因表達(dá)量有所提升,從而提高了果實(shí)對(duì)亞硫酸鹽的清除能力。再經(jīng)脫硫處理后,SO活性和S
3、O基因表達(dá)量與熏硫處理差異不大。
4.轉(zhuǎn)錄組獲得8.98 Gb數(shù)據(jù),組裝獲得45594條基因,共有33552條(73.6%)基因得到有效注釋。
5.運(yùn)用RPKM篩選差異基因及對(duì)比樣本間轉(zhuǎn)錄水平的變化,推測(cè)熏硫處理對(duì)龍眼果實(shí)的保鮮效果可能是通過抑制褐變過程中的相關(guān)上調(diào)基因的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的,并且SO2的作用效果是持久的,在進(jìn)一步的貯藏過程中,進(jìn)一步抑制相關(guān)基因的表達(dá)。GO功能注釋表明,龍眼果皮褐變很有可能是參與細(xì)胞組成的相關(guān)
4、基因在催化活性基因的催化作用下,參與代謝反應(yīng),參與龍眼果皮的褐變。
6.通過 KEGG分析了脂氧合酶代謝途徑中相關(guān)基因變化及硫代謝途徑中相關(guān)基因的變化,豐富了對(duì)龍眼脫硫的認(rèn)識(shí)和龍眼果皮褐變的調(diào)控理論。
7.以龍眼總RNA為模板,使用qPCR結(jié)果RACE的方法獲得龍眼脂氧合酶基因cDNA全長(zhǎng)序列,命名為DlLOX。序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)該基因?qū)儆?-LOX,N端信號(hào)肽比對(duì)發(fā)現(xiàn)屬于Ⅰ類,系統(tǒng)進(jìn)化樹分析結(jié)果表明龍眼脂氧合酶與荔枝進(jìn)化
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