孕激素對(duì)PR陰性的JEC的作用研究.pdf

1、目的:探討不同濃度的孕激素(P)對(duì)P受體(PR)陰性的子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系JEC體外生長的影響。 方法:選用人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系JEC進(jìn)行體外培養(yǎng)，加入含不同濃度P的培養(yǎng)液，用細(xì)胞計(jì)數(shù)、四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)的方法，觀察子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系JEC細(xì)胞的增殖活性和細(xì)胞周期時(shí)相變化；采用流式細(xì)胞術(shù)，檢測(cè)JEC細(xì)胞的細(xì)胞周期調(diào)控蛋白P21的表達(dá)。 結(jié)果:(1)細(xì)胞計(jì)數(shù)法觀察細(xì)胞增殖：用濃度為10<'-4

2、>、10<'-5>、10<'-6>、10<'-7>、10<'-8>mol/L的P作用于JEC細(xì)胞96小時(shí)，細(xì)胞數(shù)比對(duì)照組明顯下降(P<0.05)，并且隨濃度增加，細(xì)胞數(shù)也逐漸減少；當(dāng)濃度為10<'-9>、10<'-10>mol/L時(shí)，P無明顯作用(P>0.05)。10<'-4>、10<'-5>和10<'-6>mol/L的P作用96小時(shí)的細(xì)胞數(shù)相比，10<'-4>和10<'-5>組明顯低于10<'-6>組(P<0.05，但10<'-4>組

3、和10<'-5>組之間沒有差別(P>0.05)。(2)MTT法觀察細(xì)胞增殖：不同濃度P作用24小時(shí)和48小時(shí)，其OD值無明顯變化(P>0.05)；作用72小時(shí)，10<'-4>、10<'-5>、10<'-6>、10<'-7>mol/L組0D值明顯低于對(duì)照組，且差異顯著(P<0.05)，而作用96小時(shí)時(shí)，10<'-4>、10<'-5>、10<'-6>、10<'-7>、10<'-8>mol/L組0D值明顯低于對(duì)照組，差異均顯著(P<0.05)

4、，但10<'-9>、10<'-10>mol/L組的0D值和對(duì)照組相比無明顯變化(P>0.05)；實(shí)驗(yàn)組中，10<'-4>組和10<'-4>組明顯低于10<'-6>組(P<0.05)，但10<'-4>組和10<'-5>組之間沒有差別(P>0.05)。(3)流式細(xì)胞術(shù)對(duì)細(xì)胞周期分析：10<'-5>mol/L的P作用72小時(shí)，對(duì)照組和P組的G<,0>/G<,1>期細(xì)胞分別是70.18％和80.63％，S期及G<,2>/M細(xì)胞則由29.82％減

5、少到19.37％；96小時(shí)，對(duì)照組和P組的G<,0.>/G<,1>期的細(xì)胞分別是77.41％和85.59％，S期及G<,2>/M細(xì)胞由22.59％減少到14.41％。統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果均表明顯著差異(P<0.5)。(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)JEC細(xì)胞的p21的結(jié)果顯示，經(jīng)96小時(shí)培養(yǎng)，P作用組和無P作用組的JEC細(xì)胞熒光強(qiáng)度分別是3.45和3.48，二者沒有差別(P>0.05)；另外，兩組分別與各自的陰性對(duì)照之間也沒有差別(P>0.05)。