促攝食物質對吉富羅非魚攝食、生長的影響及機制研究.pdf

1、羅非魚生長速度快、食性廣，是世界上一種重要的養(yǎng)殖魚類。2014年，全球羅非魚產(chǎn)量達到545萬噸，其中中國羅非魚產(chǎn)量為169.8萬噸。隨著羅非魚養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，對飼料蛋白源的需求量不斷增加。目前，高植物蛋白飼料在羅非魚養(yǎng)殖中的應用越來越廣泛。但高植物蛋白飼料適口性普遍較差，影響羅非魚的生長和生理功能，如何通過添加適宜的促攝食物質改善羅非魚的攝食和生長性能，并探討其作用機制，在羅非魚養(yǎng)殖中具有重要的理論意義和實際應用價值。為此，本論文研究

2、了二甲基-β-丙酸噻亭（Dimethyl-β-propiothetin，DMPT）、二甲基-β-乙酸噻亭（Dimethylthetin，DMT）、甜菜堿（Betaine，Bet）、?；撬幔═aurine，Tau）、色氨酸（Tryptophan，Trp）、混合核苷酸（Mixednucleotides，Mix-NT）和魷魚膏（Squid liver paste，SQLP）等7種促攝食物質在吉富羅非魚（GIFTOreochromis nilo

3、ticus）高植物蛋白飼料中的適宜添加量和對吉富羅非魚攝食、生長的影響，并探討了的作用機制。具體研究內容和結果如下。
　　1.高植物蛋白飼料中7種促攝食物質的適宜添加量研究
　　選取560尾體重為8.59±0.04 g的吉富羅非魚，隨機分為7組，每組4個重復并且獨立循環(huán)。以4％魚粉、18%豆粕、6%雙低菜粕、20%巴基斯坦菜粕和19%棉粕為蛋白源，2%大豆油和3%磷脂油為脂肪源，26%面粉為糖源配制基礎飼料，粗蛋白水平為35

4、4.2g kg-1，能量為17.95 MJkg-1。7種促攝食物質分別設置5個添加水平：DMPT0，0.2，0.4，0.6，0.8 g kg-1；DMT，0，0.2，0.4，0.6，0.8 g kg-1；Bet，0，3，6，9，12 g kg-1；Trp，0，0.6，1.2，1.8，2.4 g kg-1；Tau，0，4，8，12，16 g kg-1；Mix-NT，0，0.4，0.8，1.2，1.6 g kg-1；SQLP，0，10，20

5、，30，40g kg-1。在基礎飼料中分別添加每一種促攝食物質的每一個添加水平，并用5種惰性元素（Y2O3、La2O3、Sm2O3、Nd2O3、Yb2O3）分別進行標記。將每一種促攝食物質的五個添加水平飼料等量混合投喂每一組羅非魚，收集糞便，分析糞便中惰性元素比例，計算羅非魚高植物蛋白飼料中每一種促攝食物質的適宜添加水平。結果顯示，羅非魚對7種促攝食物質偏好的適宜添加水平分別為：DMPT，0.4 g kg-1；DMT，0.6 g kg-

6、1；Bet，6 g kg-1；Tau，16 g kg-1；Trp，1.8 g kg-1；Mix-NT，0.4 g kg-1和SQLP，30 g kg-1。
　　2.7種促攝食物質對羅非魚高植物蛋白飼料營養(yǎng)物質表觀消化率的影響
　　選取360尾體重為62.95±3.54 g的健康吉富羅非魚隨機分為8組，每組3個重復，投喂基礎飼料（配方同1）和分別含有7種促攝食物質的試驗飼料，其添加水平分別為DMPT，0.4 g kg-1；DM

7、T，0.6 g kg-1；Tau，16 g kg-1；Mix-NT，0.4 g kg-1；Bet，6 g kg-1；Trp，1.8 g kg-1和SQLP，30 g kg-1。飼料以300 mg kg-1Y2O3作為外源性指示劑。每天投喂兩次，表觀飽食投喂。采用撈網(wǎng)法收集糞便，Y2O3采用等離子發(fā)光色譜法檢測。結果顯示，羅非魚對8種飼料的脂肪表觀消化率沒有顯著差異。羅非魚對SQLP飼料干物質、粗蛋白和能量的表觀消化率顯著低于其它各組飼料

8、。DMPT飼料干物質表觀消化率顯著高于基礎飼料。Bet飼料磷的表觀消化率顯著高于基礎飼料組。羅非魚對SQLP飼料中天冬氨酸、谷氨酸的表觀消化率顯著低于其它各試驗飼料，而羅非魚對DMPT飼料中天冬氨酸的表觀消化率顯著高于基礎、Mix-NT和Tau飼料。
　　3.7種促攝食物質在高植物蛋白飼料中對吉富羅非魚攝食、生長性能、血清生化指標、消化酶活和腸道組織結構的影響
　　在基礎配方（同1）中分別添加7種促攝食物質配制7種試驗飼料，

9、其添加水平分別為：DMPT，0.4g kg-1；DMT，0.6 g kg-1；Bet，6 g kg-1；Tau，16 g kg-1；Trp，1.8 g kg-1；Mix-NT，0.4 g kg-1；和SQLP，30 g kg-1。選取600尾體重為3.34±0.01g的吉富羅非魚，隨機分為8組，每組3個重復，分別投喂基礎飼料和7種試驗飼料。飼養(yǎng)期為8周。結果顯示，SQLP顯著提高羅非魚的攝食（FI）、末體重（FBW）和特定生長率（SGR

10、）。Mix-NT顯著提高羅非魚的FBW、SGR和飼料效率（FE）。Bet顯著提高羅非魚的蛋白質效率（PER）和FE。7種促攝食物質對全魚體組成沒有顯著影響。Trp、Bet和SQLP顯著提高臟體比（VSI）。SQLP組羅非魚血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)顯著高于其它各組。Mix-NT組腸道蛋白酶活性顯著高于其它各組，Bet組腸道和肝胰臟蛋白酶活性顯著高于基礎飼料組。DMPT、Mix-NT和Bet組腸道淀粉酶活性顯著高于其它各組，SQ

11、LP組腸道淀粉酶活性顯著高基礎飼料組。Bet和Mix-NT組腸道褶皺長度顯著高于基礎飼料、DMT和Trp組。
　　4.7種促攝食物質在高植物蛋白飼料中對吉富羅非魚肌肉品質的影響
　　試驗飼料、分組及投喂同3.。飼養(yǎng)試驗結束后，采集肌肉進行肌肉品質相關分析。結果顯示，SQLP組肌肉粗蛋白、膠原蛋白和15種氨基酸含量、蒸煮損失和Bet組肌肉肌苷酸（IMP）和11種氨基酸含量均顯著高于基礎飼料組。Bet組肌肉總超氧化物歧化酶（T-

12、SOD）活性顯著高于其它各組；而其肌肉丙二醛（MDA）含量和pH24h卻顯著低于基礎飼料組。與基礎飼料組相比，Mix-NT組羅非魚肌肉pH24h顯著降低，而過氧化氫酶（CAT）活性顯著升高；DMT組肌肉MDA含量顯著減少，而其肌肉蘇氨酸和絲氨酸含量顯著增加；DMPT組T-SOD活性、肌肉蛋氨酸含量和Tau組肌肉丙氨酸含量分別顯著升高；Trp組和Mix-NT組肌肉15種氨基酸含量與基礎飼料組相比無顯著差異。
　　5.7種促攝食物質在

13、高植物蛋白飼料中對吉富羅非魚食欲相關基因表達的影響
　　試驗飼料、分組及投喂同3.。飼養(yǎng)試驗結束后，采集腦、胃和肝胰臟，進行食欲相關基因表達量的檢測。結果顯示，Trp組腦神經(jīng)肽Y（NPY）、腦刺鼠相關蛋白（AgRP）、腦和胃膽囊收縮素（CCK）基因表達水平最高，其中，腦NPY基因表達水平與基礎飼料組相比有顯著差異；DMT組胃饑餓素（Ghrelin）基因表達水平最高，且與基礎飼料組相比有顯著差異；Tau組肝胰臟瘦素（Leptin）基

14、因表達水平最高，顯著高于其它各組。DMPT、Mix-NT和SQLP組食欲相關基因表達水平與對照組相比沒有顯著差異。
　　6.7種促攝食物質在高植物蛋白飼料中對吉富羅非魚血清GH、IGF-I含量及生長軸相關基因表達量的影響
　　試驗飼料、分組及投喂同3.。飼養(yǎng)試驗結束后，采集血清檢測GH、IGF-I含量，采集腦和肝胰臟檢測生長軸相關基因表達量。結果顯示，SQLP能顯著提高血清IGF-I含量和腦GH mRNA表達。Mix-NT能

15、顯著提高血清IGF-I含量和腦GH、肝胰臟GHR、IGF-I mRNA表達量。Bet能顯著提高腦GH mRNA表達量。DMPT、DMT、Trp和Tau對相關指標作用不顯著。
　　綜上所述：
　?。?）SQLP對羅非魚能顯著提高吉富羅非魚攝食、生長性能和肌肉粗蛋白含量，與食欲相關基因沒有明確的相關性。SQLP一方面能提高攝食促進羅非魚的生長，同時促進生長軸相關因子分泌表達促進生長。
　　（2）Mix-NT對吉富羅非魚長期

16、攝食提高作用均不顯著，與食欲相關因子沒有明確的相關性。Mix-NT能顯著提高吉富羅非魚特定生長率和飼料效率，這可能與消化酶的活性提高以及腸道組織結構改善有關；生長軸相關因子的分泌表達增加也起到一定作用。
　?。?）Bet對吉富羅非魚長期攝食沒有顯著的促進作用，但能顯著提高羅非魚的蛋白質效率和飼料效率以及肌肉蛋白含量，其機理可能在于一方面提高消化酶活性，改善腸道組織結構，提高磷的消化率，另一方面提高GH mRNA的表達。