谷胱甘肽對吉富羅非魚生長性能和抗氧化功能的影響.pdf

1、本論文研究了飼料中添加谷胱甘肽(Glutathione，GSH)對吉富羅非魚(GIFTOreochromis niloticus)生長性能、組織生化指標、非特異性免疫相關(guān)酶活性、抗氧化酶活性、總抗氧化能力、脂質(zhì)過氧化物含量以及抗亞硝基氮應(yīng)激能力的影響，并采用熒光定量PCR技術(shù)，用分子手段初步探索飼料中添加谷胱甘肽對吉富羅非魚肝臟中生長及抗氧化相關(guān)基因mRNA表達量的影響。研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　 1.飼料中添加谷胱甘肽對吉富羅

2、非魚生長、組織生化指標和非特異性免疫相關(guān)酶活性的影響。選用初始體重為（3.27±0.04）g的吉富羅非魚720尾，隨機分為6組，分別投喂添加0、80、160、240、320和400 mg/kg GSH的6種飼料，記為G0、G80、G160、G240、G320和G400。養(yǎng)殖期為7周。結(jié)果顯示，與G0相比，G320羅非魚的增重率(WGR)、特定生長率(SGR)、蛋白質(zhì)效率(PER)和肝臟RNA/DNA比顯著升高（P＜0.05），飼料系數(shù)(

3、FC)顯著降低（P＜0.05）;各添加組羅非魚的攝食量(FI)和肝體比(HSI)高于G0，但差異未達到顯著水平(P＞0.05)。G160～G320粗蛋白、G240和G320粗脂肪含量顯著高于G0(P＜0.05)，均在G240達到最高值。6組羅非魚血清中膽固醇(CH)、甘油三酯(TG)和血糖(GLU)含量無顯著性差異(P＞0.05)，但G320血清尿素氮(UN)含量與G0相比顯著降低(P＜0.05)。與對照組相比，各添加組血清和肝臟生長激

4、素(GH)以及三碘甲腺原氨酸(T3)水平均不同程度升高，但差異不顯著(P＞0.05)。G160～G400血清和肝臟類胰島素生長因子1(IGF-1)顯著高于G0和G80(P＜0.05)。G240～G400血清溶菌酶(LZM)活性顯著高于其它各組(P＜0.05)，G320～G400肝臟LZM活性顯著高于其他各組(P＜0.05)。與G0相比，G320血清一氧化氮合成酶(NOS)活性顯著升高(P＜0.05)。各添加組血清堿性磷酸酶(AKP)和酚

5、氧化酶(PO)、肝臟AKP、酸性磷酸酶(ACP)和NOS活性均高于G0，但差異不顯著(P＞0.05)。結(jié)果表明，飼料中添加一定量的谷胱甘肽能顯著提高吉富羅非魚幼魚的生長性能，提高全魚粗蛋白與粗脂肪含量、血清和肝臟IGF-1水平以及非特異性免疫相關(guān)酶活性。以增重率為評價指標，計算出吉富羅非魚幼魚飼料中谷胱甘肽的適宜添加量為355.13mg/kg。
　　 2.飼料中添加谷胱甘肽對吉富羅非魚抗氧化性能和抗亞硝基氮應(yīng)激能力的影響。上述養(yǎng)

6、殖試驗結(jié)束時，制備血清和肝臟樣品，測定血清和肝臟中抗氧化酶活性、谷胱甘肽含量、總抗氧化能力和脂質(zhì)過氧化物含量，并進行亞硝基氮應(yīng)激試驗，統(tǒng)計累積死亡率，計算相對保護率。結(jié)果顯示，G320血清和G160、G240肝臟谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)活性分別顯著高于G0(P＜0.05)。隨飼料中GSH添加量的增加，羅非魚血清和肝臟谷胱甘肽還原酶(GR)活性先升高后降低，其中G160、G240血清和G320肝臟GR活性顯著高于G0(P＜0.05)。

7、各添加組血清超氧化物歧化酶(SOD)活性均高于G0，但差異不顯著(P＞0.05)，G240肝臟SOD活性顯著高于G0(P＜0.05)。G320血清和G240肝臟過氧化物酶(CAT)活性與G0相比顯著升高(P＜0.05)。各添加組血清和肝臟GSH含量均高于G0，但差異未達到顯著水平（P＞0.05）。G240～G400血清和G240肝臟總抗氧化能力(T-AOC)分別顯著高于G0(P＜0.05)。血清和肝臟抗超氧陰離子（anti-O2-）活性

8、最高值均出現(xiàn)在G320，其中前者顯著高于G0～G240(P＜0.05)。當GSH添加量為80～320mg/kg時，肝臟丙二醛(MDA)含量顯著低于G0(P＜0.05)。在亞硝基氮應(yīng)激96 h內(nèi)，G320累計死亡率顯著低于G0，相對保護率為33.3％。結(jié)果表明，飼料中添加一定量的谷胱甘肽能顯著提高吉富羅非魚的抗氧化性能和抗亞硝基氮應(yīng)激能力。
　　 3.飼料中添加谷胱甘肽對吉富羅非魚肝臟生長及抗氧相關(guān)基因mRNA相對表達量的影響。上

9、述養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，制備肝臟樣品，采用熒光定量PCR(Real-timePCR)方法分析各組吉富羅非魚肝臟生長激素(GH)、類胰島素生長因子(IGF-1)、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)和超氧化物歧化酶(SOD)基因mRNA的相對表達量。結(jié)果顯示，肝臟GH mRNA相對表達量隨飼料GSH添加量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，但組間差異未達到顯著水平（P＞0.05）。IGF-1 mRNA相對表達量最高值出現(xiàn)在G320，與G0和G400相比顯著升高(