谷胱甘肽對黃顙魚生長性能和抗氧化功能的影響.pdf

1、本論文研究了飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）幼魚生長性能、體成分、血清生化指標、免疫抗氧化性能、血細胞凋亡、抗氨氮應激能力及生長抗氧化凋亡相關基因表達的影響。本論文主要包括以下五個方面的內容:
　　1.飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚生長性能、體成分、血清生化指標的影響
　　選用初始體重為（1.32±0.01）g的黃顙魚800尾，隨機分為5組，每組4個重復，每個重復40尾魚，分別投喂

2、基礎飼料和添加100、300、500、700mg/kg還原型谷胱甘肽的試驗飼料，飼養(yǎng)56d后，采樣分析。結果顯示，隨著飼料中谷胱甘肽添加量的增加，黃顙魚的增重、特定生長率和蛋白質效率呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢，均在添加量為300mg/kg時達到最大值，且100～500mg/kg組均顯著高于對照組(P＜0.05);各組之間的飼料系數(shù)、肥滿度和肝體比差異不顯著(P＞0.05)。與對照組相比，300～700mg/kg組全魚粗蛋白質和100～700

3、mg/kg全魚粗脂肪含量顯著升高(P＜0.05)。飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚血清總蛋白、膽固醇、甘油三酯、葡萄糖、尿素氮水平和谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶活性均無顯著影響(P＞0.05)。綜上所述，飼料中添加谷胱甘肽可以提高黃顙魚幼魚的生長性能、全魚粗蛋白質和粗脂肪含量。利用二次回歸方程擬合特定生長率和谷胱甘肽添加水平，得出谷胱甘肽在黃顙魚幼魚飼料中的適宜添加量為357.69mg/kg。
　　2.飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚免疫、抗氧

4、化性能的影響
　　上述飼養(yǎng)試驗結束后，采集肝臟和血清檢測免疫、抗氧化相關指標及谷胱甘肽含量。結果顯示，除100mg/kg組外，飼料中添加GSH顯著提高黃顙魚肝臟、血清GSH含量(P＜0.05)，當GSH添加量≥300mg/kg時，肝臟和血清GSH含量均呈現(xiàn)穩(wěn)定狀態(tài)。隨著飼料中谷胱甘肽水平的增加，血清免疫和肝臟抗氧化指標均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，其中300mg/kg和500mg/kg組溶菌酶與堿性磷酸酶活性、300mg/kg組免疫球

5、蛋白M與補體4含量、500mg/kg組酸性磷酸酶活性與對照組相比顯著升高(P＜0.05)。與對照組和700mg/kg組相比，300mg/kg組肝臟超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化酶活性和總抗氧化能力與血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化酶活性均顯著高升高(P＜0.05)。由此可見，飼料中添加谷胱甘肽能提高黃顙魚幼魚免疫及抗氧化性能，其中以300-500mg/kg為宜。
　　3.飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚血細胞凋亡的影響

6、
　　上述飼養(yǎng)試驗結束后，采集黃顙魚血細胞進行凋亡相關指標的檢測。結果顯示，隨著飼料中谷胱甘肽添加水平的增加，黃顙魚血細胞活性氧濃度和凋亡率呈先降低后升高的趨勢，其中100～500mg/kg組活性氧濃度和凋亡率均顯著低于對照組和700mg/kg組(P＜0.05)，且均在300mg/kg組最低。100mg/kg和300mg/kg組血細胞鈣離子濃度呈現(xiàn)穩(wěn)定狀態(tài)，但從500mg/kg組開始升高，且500mg/kg和700mg/kg組均顯

7、著高于100～300mg/kg組(P＜0.05)。結果表明，飼料中添加適量的谷胱甘肽可以降低黃顙魚幼魚血細胞活性氧濃度，并能使血細胞內的鈣離子濃度維持在一定的水平，能抑制血細胞的凋亡，但高劑量的谷胱甘肽會使胞漿內的鈣離子濃度顯著升高，引發(fā)細胞程序性凋亡。
　　4.飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚抗氨氮應激能力的影響
　　上述飼養(yǎng)試驗結束后，每個重復隨機選取20尾魚，用氯化銨作為應激源進行應激試驗。分別在應激72h和96h統(tǒng)計累

8、計死亡率，并在96h時采集血清和肝臟，檢測相關應激和抗氧化指標。結果顯示，應激72h和96h時，各添加組的累積死亡率均低于對照組，且隨著添加量的增加累積死亡率呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢，并均在300mg/kg組達到最低，其中96h時，100mg/kg和300mg/kg組均分別顯著低于對照組(P＜0.05)。添加組黃顙魚死亡時間較對照組延遲，96h時，各添加組黃顙魚累積死亡率均低于對照組，其中100mg/kg和300mg/kg組顯著降低(P＜

9、0.05)。應激96h時，血清皮質醇、尿素氮和血氨隨谷胱甘肽劑量的增加呈先降低后升高的趨勢，且各試驗組的血清皮質醇濃度均低于對照組，其中100mg/kg組和300mg/kg組達到顯著水平(P＜0.05)。300mg/kg組血清丙二醛含量顯著降低(P＜0.05)。氨氮應激96h時，與對照組相比，300mg/kg組肝臟和血清超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化酶活性均顯著升高(P＜0.05)，且300mg/kg組血清丙二醛含量顯著降低

10、(P＜0.05)。綜上所述，飼料中添加適量的谷胱甘肽能降低黃顙魚幼魚氨氮應激累計死亡率，降低皮質醇濃度，提高抗氧化酶活性。
　　5.飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚生長、抗氧化及凋亡相關基因mRNA表達量的影響
　　上述飼養(yǎng)試驗結束后，采集肝臟進行熒光定量分析。結果顯示，隨著谷胱甘肽量的增加，黃顙魚肝臟類胰島激素生長因子1、B淋巴細胞瘤2基因、熱休克蛋白70、雷帕霉素靶蛋白mRNA的表達量呈先升高后降低的趨勢，谷胱甘肽硫轉移酶

11、和B淋巴細胞瘤x相關基因mRNA的表達變化規(guī)律剛好相反;其中，與對照組相比，300mg/kg組和500mg/kg組類胰島激素生長因子1、100～500mg/kg組B淋巴細胞瘤2基因、各添加組熱休克蛋白70mRNA表達量顯著升高（P＜0.05），300mg/kg組B淋巴細胞瘤x相關基因mRNA表達量顯著降低(P＜0.05);各組間谷胱甘肽硫轉移酶和雷帕霉素靶蛋白mRNA表達量無顯著差異(P＞0.05)。由此可見，飼料中添加適量谷胱甘肽能上