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文檔簡介
1、 目的
探討熊去氧膽酸(UDCA)預防肝癌發(fā)生的作用及作用機制。
方法
1、培養(yǎng)肝腫瘤細胞株HepG2、BEL-7402和正常人肝細胞株L-02。用四氮唑藍(MTT)法檢測UDCA對HepG2,BEL7402及L-02細胞的增殖抑制作用;以流式細胞術、TUNEL和DNA凝膠電泳法測定UDCA誘導HepG2、BEL7402及L-02細胞凋亡的作用和其對細胞株增殖周期的影響;通過HE染色和電鏡觀察經UDCA處
2、理后細胞形態(tài)的改變;應用RT-PCR、western blot和免疫細胞化學方法檢測UDCA對上述三種細胞株的bax、bcl-2、c-myc、N-ras、P21和P53基因表達的影響。
2、以二乙基亞硝胺(DEN)建立大鼠的肝癌實驗動物模型。解剖實驗動物,觀察UDCA對實驗大鼠肝癌結節(jié)數量的影響;用免疫組織化學方法,檢查UDCA對大鼠肝組織GST-P和PCNA細胞陽性率的影響;以TUNEL方法,檢測UDCA對大鼠肝組織細胞凋亡
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