口服谷氨酸脫羧酶延緩NOD小鼠發(fā)生1型糖尿病的免疫因素探測(cè).pdf

1、目的：1.口服谷氨酸脫羧酶(GAD)對(duì)NOD小鼠糖尿病的確定發(fā)生的影響； 2.口服谷氨酸脫羧酶對(duì)NOD小鼠的量效觀察及其機(jī)理的探測(cè)； 3.口服谷氨酸脫羧酶對(duì)不同周齡NOD小鼠發(fā)病的影響； 方法：實(shí)驗(yàn)一：將3周齡NOD小鼠30只隨機(jī)分為3組，分別每周灌胃GAD3mu+IFA2ml、IFA2ml、PBS2ml，定期檢測(cè)血糖，動(dòng)態(tài)觀察各組糖尿病發(fā)生發(fā)展的過程。 實(shí)驗(yàn)二：將3周齡NOD小鼠40只隨機(jī)分為4組，分別

2、每周給予GAD0.3+IFA2ml、GAD3mu+IFA2m、GAD30mu+IFA2ml、PBS灌胃一次，定期檢測(cè)血糖；28周時(shí)全部處死，取脾、胸腺作淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定，胰腺作病理組織學(xué)觀察。 實(shí)驗(yàn)三：將3周齡NOD小鼠40只隨機(jī)分為4組，分別在3周齡、8周齡、12周齡時(shí)開始灌胃GAD3mu+IFA2ml。動(dòng)態(tài)觀察血糖、尿糖；28周時(shí)全部處死，取脾、胸腺檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群的變化及胰腺作病理組織學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)一：通過對(duì)

3、各組的血糖分析，每周口服GAD3mu+IFA2ml可以穩(wěn)定NOD小鼠的血糖，從而延緩NOD小鼠糖尿病的發(fā)生。 實(shí)驗(yàn)二：血糖資料研究發(fā)現(xiàn)，第2組(GAD3mu+IFA2ml劑量組)，具有維持NOD小鼠血糖穩(wěn)定。第2組NOD小鼠血清中IL-4在12周齡時(shí)比其他劑量組顯著升高，至28周時(shí)達(dá)最大值；28周時(shí)血清中γ-IFN水平，均值比其他劑量組值顯著降低；胸腺淋巴細(xì)胞亞群分析顯示相對(duì)的CD8+細(xì)胞所占比例最大；脾淋巴細(xì)胞亞群分析顯示CD

4、8+/CD4+比值最大；胰腺病理切片觀察胰島個(gè)數(shù)最多且胰島炎評(píng)分最低。 實(shí)驗(yàn)三自3周齡開始灌胃的1組血糖穩(wěn)定，胰島個(gè)數(shù)最多，胰島炎評(píng)分最低。GAD在NOD小鼠自身抗原未出現(xiàn)前口服自身抗原誘導(dǎo)免疫耐受，可能產(chǎn)生一些抑制性T淋巴細(xì)胞；在胸腺中，第1組CD4+陽性細(xì)胞所占比例最小，與其他時(shí)間組有明顯的差異；CD4+/CD8+比率在各組有顯著差異；在脾臟中，CD8+細(xì)胞各時(shí)間組間有顯著性；血清中IL-4水平，總趨勢(shì)增加，各組之間有差異；