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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:從麻黃湯、蒼耳子散、麻黃湯合蒼耳子散三方治療慢性鼻炎風(fēng)寒型模型小鼠的免疫功能影響入手,研究麻黃湯合蒼耳子散防治慢性鼻炎的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),闡釋“古今接軌方”的臨床意義,以實(shí)驗(yàn)的方法論證“古今接軌論”的科學(xué)性。
方法:將60只小鼠在尾部標(biāo)記后,采用體重分層隨機(jī)數(shù)字查表法分組,將其分為空白組、模型組、麻黃湯組、蒼耳子風(fēng)散組、麻黃湯合蒼耳子散組。適應(yīng)性飼養(yǎng)一周,進(jìn)行慢性鼻炎風(fēng)寒型造模,共21天。采用 SO2染毒結(jié)合過量雌激素肌注制作實(shí)
2、驗(yàn)性慢性鼻炎模型,造模結(jié)束后麻黃湯組以麻黃湯煎劑,17.369/kg,蒼耳子散組以蒼耳子散煎劑17.369/kg,麻黃湯合蒼耳子散組以麻黃湯合蒼耳子散煎劑,17.369/kg,空白組與模型組以等量生理鹽水灌胃。各組均按0.2ml/10g體重給藥,連續(xù)給藥10天后,末次給藥后進(jìn)食,不禁水,取材。首先采集血液標(biāo)本,以正確方法檢測(cè)小鼠 CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞的含量及比值、IgA的濃度、巨噬細(xì)胞吞噬百分率;取小鼠鼻部、胸腺、脾臟、肺臟,
3、并計(jì)算各組小鼠臟器指數(shù),然后固定于10%甲醛,脫鈣后經(jīng)石蠟包埋,將其制成病理切片,用HE染色后封片,采集各組織病理圖像,觀察各臟器病理組織改變,電鏡下觀察鼻粘膜厚度,計(jì)算粘膜上皮杯狀細(xì)胞數(shù)目。用 SSPS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。
結(jié)果:模型組小鼠各項(xiàng)臟器指數(shù)、相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)均低于空白組和藥物組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)和(P<0.01);鼻粘膜形態(tài)學(xué)指標(biāo)均高于空白組和藥物組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05
4、)。麻黃湯組小鼠 CD4+T、CD8+T、IgA高于空白組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)和(P<0.05),脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、終末體重低于合方組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);粘膜上皮杯狀細(xì)胞高于合方組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。蒼耳子散組的胸腺指數(shù)、CD4+T、CD8+T、粘膜厚度低于空白組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);合方組脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),CD4+T/CD8+
5、T細(xì)胞比率、呼吸道 IgA高于蒼耳子散組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),粘膜厚度、粘膜上皮杯狀細(xì)胞個(gè)數(shù)低于麻黃湯組,巨噬細(xì)胞吞噬率高于麻黃湯組和蒼耳子散組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
光鏡觀察病例組織切片顯示:空白組小鼠鼻粘膜結(jié)構(gòu)正常,無(wú)炎性改變。模型組小鼠出現(xiàn)明顯的鼻粘膜腫脹,粘膜充血水腫,部分尚有內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、粘膜下結(jié)締組織增生。藥物組鼻粘膜組織均有不同程度改善,但合方組病理改變優(yōu)于其他兩組,小鼠肺組織形態(tài)學(xué)觀
6、察,顯微鏡下空白組小鼠肺組織形態(tài)正常,模型組小鼠肺泡腔充血、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、滲出,并伴有間質(zhì)增生,合方組在炎癥反映和組織形態(tài)學(xué)改變方面,均優(yōu)于麻黃湯組、蒼耳子散組;空白組小鼠胸腺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,模型組小鼠胸腺細(xì)胞排列稀疏,皮質(zhì)變薄,髓質(zhì)擴(kuò)大,皮髓質(zhì)分界不清。藥物組胸腺細(xì)胞排列較前緊密,胸腺髓質(zhì)增寬,皮髓質(zhì)分界較清,網(wǎng)狀上皮細(xì)胞減少,可見胸腺小體,表明藥物對(duì)其病理組織有改善,尤以合方組明顯。空白組小鼠脾臟紅髓、白髓分界清楚,被膜完整。模型
7、組脾臟巨噬細(xì)胞減少,淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)減少,白髓縮小,紅髓擴(kuò)大,伴有充血,濾泡周圍見漿細(xì)胞浸潤(rùn)。合方組白髓較前增大,淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)增加,其病理表現(xiàn)的改善情況,與模型組的脾臟病理改變,優(yōu)于麻黃湯組和蒼耳子散組。
結(jié)論:
1.采用 SO2染毒結(jié)合過量雌激素肌注,并配合冷風(fēng)刺激,能誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的慢性鼻炎風(fēng)寒型模型的建立。
2.麻黃湯、蒼耳子散對(duì)慢性鼻炎風(fēng)寒型模型小鼠形態(tài)組織、免疫器官指數(shù),免疫學(xué)指標(biāo)均有積極影響,但與麻黃
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