自噬通過降解MBP參與腦白質(zhì)損傷過程.pdf

1、目的：
　　探討自噬在新生鼠缺氧致腦白質(zhì)損傷過程中的作用。
　　方法：
　　選取3日齡的SD大鼠100只，同窩隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham）和缺氧組(HI)，每組各50只，假手術(shù)組僅分離左側(cè)頸總動(dòng)脈，缺氧組通過分離左側(cè)頸總動(dòng)脈聯(lián)合缺氧40min建立新生兒腦白質(zhì)缺血缺氧模型；通過實(shí)驗(yàn)大鼠左眼睜眼時(shí)間觀察以及組織病理學(xué)觀察、超微病理學(xué)觀察來評(píng)估腦白質(zhì)損傷情況；通過免疫組化染色及Western blot方法檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC

2、3、Bclin1和髓鞘相關(guān)蛋白MBP的表達(dá)情況來評(píng)估自噬在新生鼠腦缺血缺氧誘導(dǎo)腦白質(zhì)損傷過程中的作用及自噬與髓鞘相關(guān)蛋白MBP的表達(dá)減少間的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用PSPP17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。
　　結(jié)果：
　?。?）P3大鼠左側(cè)頸總動(dòng)脈聯(lián)合缺氧40min可成功建立腦白質(zhì)損傷模型，表現(xiàn)為睜眼時(shí)間延遲，HE染色見白質(zhì)結(jié)構(gòu)疏松，電鏡觀察髓鞘生成減少，自噬體增加；
　?。?）新生鼠腦缺血缺氧會(huì)引起腦白質(zhì)MBP表達(dá)下調(diào)，缺血缺氧后4

3、8h時(shí)下調(diào)的比率最明顯（P<0.05）；
　?。?）新生鼠輕度腦缺血缺氧12小時(shí)即可誘導(dǎo)腦白質(zhì)發(fā)生自噬,并在缺血缺氧48h后自噬水平達(dá)到高峰（P<0.05）；
　　(4)免疫熒光雙標(biāo)共定位結(jié)果顯示自噬表達(dá)和MBP蛋白表達(dá)有部分重合。
　　結(jié)論：
　　（1）新生鼠腦缺血缺氧可誘導(dǎo)腦白質(zhì)發(fā)生自噬，且自噬水平變化呈缺血缺氧—時(shí)間依賴性；
　?。?）新生鼠腦缺血缺氧后MBP表達(dá)減少可能與自噬介導(dǎo)MBP的降解有關(guān)，提