綠原酸對視網膜色素上皮細胞氧化損傷保護作用的實驗研究.pdf

1、目的:研究綠原酸(chlorogenic acid,CGA)對過氧化氫(Hydrogen peroxide)處理的人視網膜色素上皮細胞(ARPE-19)細胞抗氧化損傷的保護作用,為將來臨床上利用綠原酸治療老年黃斑變性提供實驗依據。
　　方法:過氧化氫(H2O2)以濃度和時間梯度作用于ARPE-19,通過MTT法檢測細胞活性,建立 ARPE-19細胞氧化損傷模型。采用 MTT法檢測 CGA對ARPE-19細胞的增殖及毒性作用。實驗分

2、3組:正常對照組,H2O2模型組, CGA+H2O2干預組。應用紫外分光光度計法測定細胞內超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的變化;Hoechst33258染色及流式細胞術檢測細胞凋亡情況。
　　結果:1.H2O2以濃度和時間梯度誘導ARPE-19細胞凋亡,建立氧化損傷模型適宜條件為500μmol/L的 H2O2作用HRPE細胞24h。2.綠原酸各濃度組ARPE-19細胞活性與空白對照組比較,差

3、異無統(tǒng)計學意義;綠原酸各濃度干預組細胞活性較H2O2模型組高,在CGA濃度為100μmol/L,活性最高,選此濃度進行后續(xù)實驗。3.與正常對照組相比,H2O2模型組SOD活性、GSH含量下降, MDA含量增加,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);與H2O2模型組相比, CGA干預組的 SOD活性及 GSH含量均升高,MDA含量下降,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。4.與正常對照組比較,H2O2模型組的凋亡率顯著增加,差異具有統(tǒng)計學意義