綠原酸對氧化應激損傷人視網膜色素上皮細胞保護作用的分子機制.pdf

1、分類號：密級：UDC：學號：406521411262南昌大學碩士研究生學位論文綠原酸對氧化應激損傷人視網膜色素上皮細胞綠原酸對氧化應激損傷人視網膜色素上皮細胞保護作用的分子機制保護作用的分子機制Protectiveeffectofchlogenicacidagainstoxidativestressinhumanretinalpigmentepithelialcellsthemolecularmechanisminvolvedinthi

2、sprotection鄒玉凌鄒玉凌培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學第二附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱：游志鵬教授、主任醫(yī)師申請學位的學科門類：醫(yī)學學科專業(yè)名稱：眼科學論文答辯日期：2014年6月答辯委員會主席：易敬林評閱人：俞方良廖洪斐2014年5月摘要II摘要目的：目的：觀察綠原酸（CGA）對過氧化氫誘導的氧化應激損傷人視網膜色素上皮細胞(ARPE19)的保護作用，通過觀察視網膜色素上皮細胞在過氧化氫處理后細胞凋亡相關分子的表達變化，探討綠原

3、酸對氧化應激的視網膜色素上皮細胞的抗凋亡作用及其可能的分子機制，為將來臨床上利用綠原酸治療年齡相關性黃斑變性等與氧化應激相關的眼病提供理論依據。方法：方法：1、參考國外相關文獻，以500uM濃度的過氧化氫(H2O2)作用于ARPE19人視網膜色素上皮細胞24h，建立氧化應激損傷模型。2、WST1細胞增殖實驗檢測綠原酸對ARPE19人視網膜色素上皮細胞的毒性，綠原酸處理細胞24h后待檢。3、實驗分三組：正常對照組，過氧化氫建模組，綠原酸保

4、護組。WST1細胞增殖實驗檢測各組細胞存活率。4、采用流式細胞儀檢測每個實驗組ARPE19細胞的凋亡率。5、通過RTPCR檢測每個實驗組細胞的Bcl2和Caspase3基因表達水平。6、通過Westernblot檢測每個實驗組細胞的Bcl2和Caspase3蛋白表達水平。結果：結果：1、不同濃度的CGA（12.5uM，25uM50uM100uM200uM）處理ARPE19人視網膜色素上皮細胞24h后，各實驗組ARPE19細胞的相對細胞活

5、力（cellviability）與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義；說明0~200uM濃度的CGA對ARPE19人視網膜色素上皮細胞沒有表現(xiàn)出明顯的毒性作用。2、各實驗組的相對細胞活力H2O2建模組低于對照組（P＜0.05），50uM100uM200uM的CGA保護組高于H2O2建模組（P＜0.05）；說明H2O2能夠誘導ARPE19人視網膜色素上皮細胞氧化應激損傷，而CGA具有保護過氧化氫誘導的ARPE19人視網膜色素上皮細胞的氧化應激損傷