黃芩苷銅穩(wěn)定性分析及其對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性肝損傷影響的研究.pdf

1、黃芩苷是中藥黃芩的主要活性成分，屬于黃酮類化合物，具有抗菌、利尿和解熱等生物活性，其分子中存在羰基、羧基和大量羥基等富含孤對(duì)電子的基團(tuán)，能與金屬離子發(fā)生配合反應(yīng)。本課題組先前的研究表明，黃芩苷銅配合物對(duì)枯草桿菌、沙門氏菌和白色念珠菌等菌種的抗菌活性較黃芩苷強(qiáng)，對(duì)肺癌細(xì)胞A549和肝癌細(xì)胞HepG2的細(xì)胞毒性也強(qiáng)于黃芩苷。本文考察了黃芩苷銅在水溶液中的穩(wěn)定性，通過小鼠肝損傷模型觀察黃芩苷銅對(duì)肝酶活性和肝細(xì)胞形態(tài)的影響，并研究了黃芩苷銅對(duì)炎

2、癥反應(yīng)的抗炎活性。
　　將黃芩苷銅溶于1％的NaOH溶液中，配制成30μg/mL的溶液，分別在60℃高溫、相對(duì)濕度90％±5％、4500 lx±500 lx強(qiáng)光照射下于第0天、第5天和第10天后用紫外法在289 nm處測(cè)定其含量變化。結(jié)果表明，高溫對(duì)黃芩苷銅溶液的穩(wěn)定性有明顯影響（溶液的含量變化大于5％），高濕和強(qiáng)光對(duì)黃芩苷銅溶液無明顯影響（含量變化在5％以內(nèi)）。
　　黃芩苷銅對(duì)小鼠肝損傷影響的研究分八組。第一組為空白對(duì)照組

3、;第二組、第三組和第四組為單純給藥組，分別給小鼠肌注低、高劑量黃芩苷銅(50 mg/kg，100mg/kg)和灌胃聯(lián)苯雙酯(150 mg/kg);第五組為CCl4模型組;第六組、第七組和第八組為模型給藥組，分別給小鼠肌注50 mg/kg、100 mg/kg黃芩苷銅和灌胃150mg/kg聯(lián)苯雙酯，末次給藥2小時(shí)后分別腹腔注射CCl410 mL/kg(1％，v/v)。除空白組和CCl4模型組外，各試驗(yàn)組每日給藥一次，連續(xù)12日。禁食16小時(shí)

4、后采血測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，單純給藥黃芩苷銅組小鼠的肝指數(shù)和肝細(xì)胞形態(tài)與空白組相比無明顯變化;注射CCl4后，小鼠的肝指數(shù)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)明顯升高，超氧化物歧化酶(SOD)含量明顯減少;黃芩苷銅能明顯降低CCl4引起的小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶升高、降低肝指數(shù)和增加肝臟SOD的含量，并呈劑量依賴關(guān)系。HE染色發(fā)現(xiàn)，黃芩苷銅能減輕CCl4引起的小鼠肝細(xì)胞的炎性浸潤(rùn)和肝索紊亂程度。說明黃芩苷銅對(duì)CCI4引起的小鼠肝損傷有保護(hù)作

5、用。
　　取空白組、單純給藥黃芩苷銅組（第二組和第三組）小鼠的肝臟各1.0 g，酸化后用水定容成50 mL，采用原子吸收光譜法測(cè)定小鼠肝臟中銅離子的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，低劑量(50 mg/kg)和高劑量(100 mg/kg)黃芩苷銅在小鼠肝臟內(nèi)的蓄積量分別是3.83 ppm和5.94 ppm，未超過中科院報(bào)道的LD50110 ppm。所以本文中小鼠體內(nèi)的銅離子未超過限量，不會(huì)引起重金屬中毒。
　　黃芩苷銅對(duì)小鼠耳腫脹影響的研

6、究分四組。第一組為空白對(duì)照組;第二組和第三組分別給小鼠肌注50 mg/kg和100 mg/kg黃芩苷銅;第四組為陽(yáng)性對(duì)照組，小鼠灌胃給藥20 mg/kg地塞米松。除空白組外，各試驗(yàn)組每日給藥一次，連續(xù)12日。末次給藥后在每只小鼠右耳均勻涂二甲苯30μL致炎，左耳不涂為自身對(duì)照。致炎1小時(shí)后處死小鼠，用打孔器在同一部位取下耳片，稱重，以左右耳片重量差來表示炎性腫脹程度，并求出腫脹度抑制率(％)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，低劑量(50mg/kg)黃芩苷