腦不對(duì)稱影響B(tài)alb-c小鼠海馬、下丘腦細(xì)胞因子的研究.pdf

1、背景與目的:
　　腦不對(duì)稱可以影響免疫系統(tǒng),右利、左利和雙利小鼠的部分免疫指標(biāo)具有異質(zhì)性。腦不對(duì)稱也可以影響中樞神經(jīng)系統(tǒng),腦中多種神經(jīng)遞質(zhì)、細(xì)胞因子均與腦不對(duì)稱有關(guān)。神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)中,下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA軸)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的重要途徑。在這個(gè)途徑中前炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6對(duì)HPA軸的激活具有重要作用,主要在海馬、下丘腦水平。本文旨在通過(guò)檢測(cè)海馬、下丘腦前炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6的水平,來(lái)研

2、究腦不對(duì)稱影響神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)的可能機(jī)制。從而探討腦不對(duì)稱影響神經(jīng)內(nèi)分泌的免疫生物學(xué)意義。
　　材料和方法:
　　Balb/c健康小鼠共98只,雌性,4周齡,經(jīng)伸爪取食法按右利分(伸爪50次中伸右爪的次數(shù))給每只小鼠評(píng)分,將小鼠區(qū)別為左利鼠、右利鼠和雙利鼠3組。0~20分為左利鼠,30~50分為右利鼠,21~29分為雙利鼠。區(qū)分后1周將每組小鼠再分為實(shí)驗(yàn)組和正常生理組。實(shí)驗(yàn)組每只小鼠以LPS(lipopolysaccharide

3、)5μg/0.5mL NS、正常生理組以0.5mL NS腹腔注射。2h后快速斷頭殺鼠,迅速分離出左右雙側(cè)葉海馬、下丘腦,制備10％海馬、下丘腦勻漿液,離心,取上清檢測(cè)IL-1β、IL-6蛋白水平( ELISA法)。另取一批左利、右利和雙利小鼠分別注射LPS和NS,2h后殺鼠,并迅速分離海馬和下丘腦組織并盡快提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄后用熒光定量PCR法檢測(cè)IL-1β、IL-6 RNA的拷貝數(shù)。
　　結(jié)果:
　　1、Balb/c小鼠

4、(不分左利、右利和雙利),左右兩側(cè)海馬的IL-1β、IL-6水平相同,LPS刺激后兩側(cè)海馬IL-1β等比例升高(P<0.01);兩側(cè)海馬IL-6無(wú)變化。
　　2、海馬在正常生理狀況下, IL-1β水平在右、左和雙利鼠的兩側(cè)海馬中基本相同;LPS刺激后IL-1β水平在右、左利和雙利鼠的左、右兩側(cè)海馬均升高,升高幅度為右利>左利(P<0.05)>雙利(P<0.01);mRNA水平檢測(cè)也表明右利鼠海馬IL-1βmRNA升高幅度大于左利和

5、雙利鼠(P<0.05)。
　　3、在正常生理狀況下,海馬內(nèi)IL-6水平為右利>左利(P<0.01)>雙利(P<0.001),左右兩側(cè)相同。LPS刺激后總體水平無(wú)變化,左、右利鼠的IL-6水平在左側(cè)海馬有下降趨勢(shì);IL-6水平在右側(cè)海馬升高,其中右利鼠的右側(cè)海馬升高明顯( P<0.05);mRNA水平檢測(cè)也表明右利鼠右側(cè)海馬IL-6 mRNA升高幅度明顯大于左側(cè)(P<0.05)。
　　4、下丘腦IL-1β水平:在正常生理狀況下

6、,左利鼠和右利鼠基本相同,左利鼠和右利鼠的IL-1β水平明顯高于雙利鼠(P<0.01),LPS刺激后無(wú)明顯變化;mRNA水平檢測(cè)表明Balb/c小鼠下丘腦IL-1βmRNA表達(dá)水平在LPS刺激后明顯升高,升高幅度為右利等于于左利和雙利鼠。
　　5、下丘腦IL-6水平:在正常生理狀況下,左利鼠和右利鼠基本相同,左利鼠和右利鼠的IL-6水平明顯高于雙利鼠, LPS刺激后左利鼠、右利鼠和雙利鼠下丘腦IL-6水平無(wú)明顯變化;mRNA水平檢

7、測(cè)表明Balb/c小鼠下丘腦IL-6mRNA表達(dá)水平在LPS刺激后明顯升高,升高幅度為右利鼠小于左利和雙利鼠。
　　6、在生理狀況下,海馬IL-6蛋白、下丘腦IL-1β和IL-6蛋白水平與腦不對(duì)稱有關(guān);而mRNA水平未發(fā)現(xiàn)腦不對(duì)稱小鼠之間有明顯差異。
　　結(jié)論:
　　腦不對(duì)稱影響B(tài)alb/c小鼠海馬和下丘腦細(xì)胞因子IL-1β、IL-6水平, LPS刺激后右利鼠海馬IL-1β、IL-6水平均高于左利和雙利鼠。雙利鼠下丘腦