MiR-126在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及質(zhì)粒構(gòu)建研究.pdf

1、目的:評(píng)估m(xù)iR-126在不同腎組織和不同腎細(xì)胞株之間的表達(dá)差異，初步判斷miR-126在腎癌的發(fā)生和進(jìn)展中可能扮演的角色，同時(shí)，構(gòu)建miR-126過(guò)表達(dá)和敲低質(zhì)粒為后續(xù)的功能研究做準(zhǔn)備。
　　 方法:收集中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院17例配對(duì)的腎透明細(xì)胞癌與癌旁組織標(biāo)本，22例轉(zhuǎn)移性透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌組織標(biāo)本，培養(yǎng)正常人腎近曲小管上皮細(xì)胞株HKC以及腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞株786-O、769P、Caki-1、ACHN、SN12-PM6。逆轉(zhuǎn)錄

2、miR-126為cDNA模板，熒光定量PCR采用SYBER Green染料法比較Ct值。構(gòu)建miR-126過(guò)表達(dá)質(zhì)粒(pIRES2-EGFP-miR-126-over)和miR-126敲低質(zhì)粒(pIRES2-EGFP-miR-126-sponge)使用轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染入293T細(xì)胞內(nèi)驗(yàn)證其效能。
　　 結(jié)果:miR-126在局限性腎癌組織中的表達(dá)與癌旁組織沒(méi)有顯著的差異(P=0.8963)，miR-126在轉(zhuǎn)移性腎癌組織中較局限性腎

3、癌組織表達(dá)上調(diào)。與HKC相比，miR-126在786-O和769P中高表達(dá)，與786-O和769P相比，miR-126在Caki-1、ACHN和SN12-PM6中低表達(dá)。與空質(zhì)粒和只加轉(zhuǎn)染試劑兩個(gè)對(duì)照組相比，miR-126過(guò)表達(dá)和敲低質(zhì)粒依次使得293T細(xì)胞中的miR-126明顯升高和沒(méi)有顯著改變。
　　 結(jié)論:miR-126可能在腎癌的不同階段和不同的組織成分中發(fā)揮著不同的作用，構(gòu)建的miR-126過(guò)表達(dá)和敲低質(zhì)?？梢宰鳛閺?qiáng)有