miR-223在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)和作用.pdf

1、目的:mi croRNAs(mi RNAs)是一類堿基長度約22個(gè)堿基的非編碼小RNA。隨著miRNA的研究進(jìn)展，越來越多證據(jù)表明，這類不編碼蛋白的小RNA通過轉(zhuǎn)錄后調(diào)控等機(jī)制，不同程度地參與了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。近年來的研究發(fā)現(xiàn)miR-223在感染、炎癥和腫瘤中起著重要的作用。在腫瘤研究中發(fā)現(xiàn)，miR-223和白血病，肝細(xì)胞腫瘤，食管癌等腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系，但是其在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及作用目前尚未有報(bào)道。本研究主要探討miR

2、-223在腎透明細(xì)胞癌組織和其瘤旁組織中的表達(dá)，并分析病人臨床資料及相關(guān)性。同時(shí)在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系中上調(diào)miRNA，研究其對腫瘤的增殖與侵襲能力的影響，分析miR-223在腎透明細(xì)胞癌發(fā)生與發(fā)展中的作用，為臨床診斷和治療尋找新的方向。
　　方法:①采用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time RT-PCR)法檢測miR-223在腎透明細(xì)胞癌組織和瘤旁組織中的表達(dá)，并通過SPSS統(tǒng)計(jì)軟件分析所選病例臨床數(shù)據(jù)與miR-223表達(dá)量

3、的關(guān)系。同時(shí)檢測腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系786-0、Caki-1、Sn12-pm6、ACHN以及正常人近段腎小管上皮細(xì)胞系HKC中miR-223的表達(dá)量。②通過人工脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法，采用miR-223模擬物轉(zhuǎn)及對照無意義序列分別轉(zhuǎn)染腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系786-0。③通過transwell遷移實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)染miR-223模擬物后的786-0細(xì)胞的遷徙能力的變化，采用MTS法檢測其增殖情況的變化，并通過流失細(xì)胞儀分析其細(xì)胞周期的變化。

4、>　　結(jié)果:①miR-223在腎透明細(xì)胞癌組織和腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系中的表達(dá)量明顯高于瘤旁組織(P=0.0003)和正常腎小管上皮細(xì)胞，分析病例的臨床數(shù)據(jù)顯示miR-223的表達(dá)量與腫瘤的大小有關(guān)，腫瘤直徑大于4cm的腫瘤miR-223表達(dá)量升高(P=0，0028)。②在transwell遷移實(shí)驗(yàn)中，轉(zhuǎn)染miR-223模擬物的786-0細(xì)胞遷移的細(xì)胞數(shù)量比轉(zhuǎn)染無意義序列的對照組遷移數(shù)多(P＜0.0001)，劃痕實(shí)驗(yàn)顯示轉(zhuǎn)染miR-223模

5、擬物的786-0細(xì)胞愈合能力比轉(zhuǎn)染無意義序列的對照組快，增殖實(shí)驗(yàn)表明轉(zhuǎn)染miR-223模擬物的786-0細(xì)胞增殖速度快于轉(zhuǎn)染無意義序列的對照組(P=0.006)，細(xì)胞周期顯示轉(zhuǎn)染miR-223模擬物的786-0細(xì)胞G1期細(xì)胞數(shù)減少，S期細(xì)胞增加，提示處于增殖的細(xì)胞數(shù)多(p＜0.05)。
　　結(jié)論:①miR-223的異常表達(dá)可能與腎透明細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展有關(guān)。②上調(diào)miR-223的表達(dá)可促進(jìn)腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞株的增殖和遷移能力。③上調(diào)mi