大鼠腹部切口模型的建立和脊髓HMGB1-RAGE表達的變化.pdf

1、目的:1.模擬臨床圍術期，通過不同程度的切割性損傷，建立腹部切口模型，比較不同程度的手術創(chuàng)傷導致的應激反應和生理功能變化，為圍術期器官損傷、應激機制和藥理作用的研究提供穩(wěn)定的動物模型。2.通過觀察脊髓HMGB1、RAGE表達的變化，研究HMGB1/RAGE信號通路在組織損傷和應激反應中的作用，進一步驗證該動物模型的可靠性。
　　 方法:1.成年雄性SD大鼠36只，根據手術切口的不同部位、大小和深度隨機分為6組(n=6):Cont

2、rol組（C組），尾靜脈置管、輸液，丙泊酚靜脈麻醉，右股動脈插管測血壓;Brennan組（B組），參照Brennan模型，于左后足底作長1cm的縱行切口，切割皮膚和肌肉層;Muscle1組(M1組)，劍突下0.5cm作長1cm的縱行切口，切割皮膚和肌肉層;Muscle2組(M2組)，切口長2cm，切割的部位和深度同M1組;Muscle4組(M4組)，切口長4cm，切割的部位和深度同M1組;Skin4組（S4組），劍突下0.5cm作長4c

3、m的縱行切口，僅切割皮膚層。清醒狀態(tài)下行尾靜脈穿刺置管，面罩吸氧，丙泊酚麻醉誘導和維持，麻醉深度調控在鎮(zhèn)靜狀態(tài)而無明顯鎮(zhèn)痛作用的水平。行右股動脈插管，持續(xù)監(jiān)測平均動脈壓(MAP)、脈率(PR)、呼吸頻率(RR)、體溫(T)等生命體征。術前、術后肌注青霉素預防傷口感染。比較術中生命體征和術后體重(BW)、攝食量(FC)的組間差別，觀察行為學改變和傷口愈合情況。2.術后滿7天，深麻醉下經灌注固定取大鼠脊髓，HE染色行組織形態(tài)學觀察，IHC法

4、檢測脊髓HMGB1、RAGE的表達水平。
　　 結果:1.與C組比較，手術組的MAP較高、PR和RR較快，術后BW和FC明顯下降;2.M1、M2、M4組的MAP、PR和RR依次遞增，術后BW和FC的下降程度逐步加重;3.與S4組比較，M4組的應激反應水平更高，持續(xù)時間更長;4.與M1組比較，B組MAP、PR和RR的水平更高，但術后FC的下降程度較M1組小;5.術后7天，相應節(jié)段的脊髓HMGB1、RAGE表達水平隨著組織損傷的程度

5、而升高，以M2、M4組陽性表達明顯。以上差別均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結論:1.本大鼠腹部切口模型建立成功，為研究手術創(chuàng)傷對機體的影響和不同程度損傷之間的差異性提供實驗平臺。2.隨著創(chuàng)傷程度的加重，腹部切割傷導致的應激反應加劇;軀體深部組織損傷比淺組織損傷引起更明顯的應激反應和生理功能障礙;相同程度的切割傷，足底損傷時呼吸、循環(huán)反應更大，腹壁損傷時攝食量下降更明顯。3.HMGB1、RAGE在組織損傷和應激反應的過程