尾加壓素Ⅱ及其受體在GK鼠大動(dòng)脈中表達(dá)量的增高及其意義.pdf

1、目的：
　　 探討尾加壓素Ⅱ(UrotensinⅡ)及其受體(GPR14)在糖尿病血管并發(fā)癥形成及發(fā)展中的作用及其意義，探尋糖尿病血管并發(fā)癥預(yù)防及治療的新途徑。
　　 方法：
　　 試驗(yàn)分為自發(fā)性糖尿病模型GK大鼠組與正常Wistar大鼠組，大鼠均選擇雄性，3-5個(gè)月月齡，體重300-350g，于山東省口腔醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室層流架內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)，隨機(jī)檢測(cè)大鼠血糖濃度，要求隨機(jī)檢測(cè)中GK大鼠血糖高于11.1 mol/L，wi

2、star大鼠血糖低于11.1mol/L，合格老鼠被麻醉致死并于無(wú)菌條件下立即取出升主動(dòng)脈直至胸主動(dòng)脈。動(dòng)脈取下后隨機(jī)切下適量組織送病理科做冰凍切片后進(jìn)行HE染色及油紅0染色。剩余組織編號(hào)并平均分為兩組。一組固定于4％多聚甲醛，一組保存于-80℃保存。固定于4％多聚甲醛組進(jìn)行免疫組化檢測(cè)，保存于-80℃組行RT-PCR檢測(cè)。通過(guò)HE染色及油紅O染色篩選出符合實(shí)驗(yàn)要求主動(dòng)脈組織，通過(guò)免疫組化了解尾加壓素Ⅱ及其受體表達(dá)部位及與對(duì)照組相比表達(dá)量

3、的高低。通過(guò)RT-PCR檢測(cè)尾加壓素Ⅱ及其受體mRNA表達(dá)量的多少及其意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過(guò)對(duì)大鼠血糖隨機(jī)檢測(cè)選取正常的GK大鼠與Wistar大鼠，即：GK大鼠隨機(jī)血糖監(jiān)測(cè)達(dá)11. lmol/L以上，Wistar大鼠隨機(jī)血糖監(jiān)測(cè)正常。
　　 2.通過(guò)HE染色及油紅0染色我們選取主動(dòng)脈組織符合以下條件：①血管的內(nèi)膜，中膜，外膜有著清晰的輪廓。②血管內(nèi)皮表面覆蓋有單層上皮細(xì)胞。③單層上皮細(xì)胞是完整的并且

4、連續(xù)的。④平滑肌細(xì)胞與彈力纖維界限清晰排列規(guī)整。⑤鏡下沒(méi)有脂質(zhì)條紋，沒(méi)有纖維斑塊，沒(méi)有動(dòng)脈粥樣硬化斑塊。
　　 3.免疫組化試驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)尾加壓素Ⅱ及其受體在GK鼠中表達(dá)量明顯高于Wistar大鼠，特別是尾加壓素Ⅱ，GK鼠動(dòng)脈組織中血管內(nèi)膜及外膜中的表達(dá)量明顯增高。相對(duì)于wistar大鼠，尾加壓素Ⅱ受體在GK鼠動(dòng)脈組織內(nèi)膜中的表達(dá)量顯著增高，而在外膜，二者沒(méi)有明顯區(qū)別。同時(shí)我們從免疫組化中可以看出，血管外膜中尾加壓素Ⅱ及其受體表

5、達(dá)的非常廣泛及彌散。
　　 4.RT-PCR結(jié)果與免疫組化基本一致，血管外膜中我們發(fā)現(xiàn)尾加壓素Ⅱ受體表達(dá)量沒(méi)有明顯區(qū)別(P＞0.05)，而尾加壓素Ⅱ表達(dá)量在GK鼠中明顯高于wistar大鼠(P＜0.01)。在去掉血管外膜的組織中無(wú)論是尾加壓素Ⅱ還是其受體，GK鼠中明顯高于wistar大鼠(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 通過(guò)試驗(yàn)分析我們發(fā)現(xiàn)尾加壓素Ⅱ及其受體在糖尿病血管并發(fā)癥發(fā)生之前已經(jīng)高表達(dá)于動(dòng)脈組織，結(jié)