白細胞介素18、ICE在卵巢上皮性癌中表達及其意義的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文白細胞介素18、ICE在卵巢上皮性癌中表達及其意義的研究姓名：郅玲玲申請學位級別：碩士專業(yè)：婦產科學指導教師：郝淑維20050301中文摘要方法:本研究標本取自河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院2003年2月至2004年8月在婦產科初次治療的卵巢癌患者，術后均經病理確診。卵巢上皮性癌患者32例，其中漿液性癌15例，粘液性癌7例，子宮內膜樣癌10例。根據國際婦產科聯盟FIGO1986年)標準分期，I、II期8例，IIIN期24例

2、。選擇同期因婦科良性疾病手術治療患者的正常卵巢組織10例，6例良性卵巢腫瘤，其中3例為漿液性囊腺瘤3例為粘液性囊腺瘤。所有標本于術中離體半小時內取材，立即置于液氮速凍，并保存于一80℃冰箱備用。另留取一份經10%福爾馬林固定，石蠟包埋。切片備用。1.半定量逆轉錄一聚合酶鏈反應(RTPCR)方法檢測IL18ICE基因的表達。從癌組織標本中或卵巢癌細胞中提取RNA，并通過電泳和紫外分光光度儀檢測總RNA的完整性和純度。對總RNA定量后進行R

3、TPCR擴增。用0actin作為內參照。反應完畢對RTPCR擴增產物進行電泳分離，用凝膠成像系統(tǒng)觀察電泳DNA條帶，并用凝膠成像分析軟件對結果進行相對定量分析。2.免疫組織化學方法及免疫細胞化學方法進行IL18ICE蛋白定位。組織標本切片，常規(guī)脫臘至水，3%甲醇過氧化氫液室溫巧分鐘，以去除內源性過氧化物酶，構橡酸緩沖液進行熱抗原修復。血清封閉，加入1:200兔抗人IL181:50兔抗人ICE抗體4℃過夜，滴加11抗、III抗，DAB顯色