白細(xì)胞介素1及其受體在機(jī)械性腦損傷時(shí)的表達(dá)及意義.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)通過復(fù)制Marmarou's大鼠閉合性顱腦損傷模型，采用組織芯片及免疫組化技術(shù)，研究閉合性腦損傷后白介素1(IL-1)及其受體IL-1RI在腦組織中的表達(dá)部位、時(shí)序性特點(diǎn)及二者之間的相互關(guān)系。探討機(jī)械性腦損傷時(shí)的致傷機(jī)制，為機(jī)械性腦損傷的早期診斷和治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法：采用清潔級(jí)SD大鼠60只，體重350-400g。隨機(jī)分為正常對(duì)照組、手術(shù)對(duì)照組及損傷后1h組、2h組、4h組、8h組、12h組、24h組、2d

2、組、3d組、5d組。 復(fù)制Marmarou's大鼠落體打擊損傷模型。進(jìn)行4％多聚甲醛灌注固定、取材。HE、棓花青(Einarson氏)尼氏體染色法觀察損傷病理改變。用組織芯片儀制作組織芯片，SP法檢測(cè)腦組織皮質(zhì)、海馬和腦干神經(jīng)細(xì)胞IL-1、IL-1RI的表達(dá)情況。采用Mias2000圖像分析系統(tǒng)采集并計(jì)算陽(yáng)性組胞數(shù)。全部數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5forwindows分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，以P＜0.05為顯著性差異的水準(zhǔn)。

3、 研究結(jié)果： 1.病理學(xué)改變：損傷組可見硬膜下出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血、側(cè)腦室出血，小挫傷灶。部分神經(jīng)細(xì)胞胞體固縮、深染、拉長(zhǎng)，或呈三角形。細(xì)胞核小而深染，樹突深染，常呈波浪狀；部分神經(jīng)細(xì)胞胞體腫脹，胞漿變空，核淡染，核膜及核仁完整。腦細(xì)織水腫，腦干部分神經(jīng)纖維增粗、呈波浪狀改變。 2.IL-1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：對(duì)照組皮層、海馬、腦干部位均有少量陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。陽(yáng)性物質(zhì)呈棕黃色，定位于細(xì)胞漿和細(xì)胞核，胞漿著色較淡，核仁呈陰

4、性，部分細(xì)胞可見彎曲，螺旋狀樹突及軸突。損傷組皮層、海馬、腦干部位IL-1免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目增多，免疫陽(yáng)性物質(zhì)增加，膠質(zhì)細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。主要位于皮質(zhì)打擊、對(duì)沖部位，海馬以CA3、CA4區(qū)及齒狀回表達(dá)明顯，CA2區(qū)表達(dá)較弱。腦干免疫反應(yīng)陽(yáng)性神經(jīng)細(xì)胞及膠質(zhì)細(xì)胞增多。頂葉皮層IL-1免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)，損傷后30min表達(dá)開始增多，2h達(dá)最大值，然后逐漸降低。與對(duì)照組比較，損傷后30min-12h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷

5、后24h-5d組差別無(wú)顯著意義(p＞0.05)。海馬IL-1免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)，損傷后30min開始增多，損傷后2h達(dá)高峰，然后逐漸降低。與對(duì)照組比較，損傷后30min-12h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷后24h-5d組差別無(wú)顯著意義(p＞0.05)。腦干IL-1免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)，損傷后30min開始增多，損傷后2h達(dá)高峰，然后逐漸降低。與對(duì)照組比較，損傷后30min-12h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷后2

6、4h-5d組差別無(wú)顯著意義(p＞0.05)。 3.IL-1RI免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：對(duì)照組皮層、海馬、腦干部位均有少量IL-1RI免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。陽(yáng)性物質(zhì)呈棕黃色，定位于細(xì)胞漿和細(xì)胞核，胞漿著色較淡，核仁呈陰性。損傷組皮層、海馬、腦干部位IL-1RI免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目增多，免疫陽(yáng)性物質(zhì)增加，膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)尤為明顯，呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。主要位于頂葉皮層、對(duì)沖部位，海馬CA3、CA4區(qū)及齒狀回表達(dá)明顯。腦干免疫反應(yīng)陽(yáng)性神經(jīng)細(xì)胞及膠質(zhì)

7、細(xì)胞增多。頂葉皮層IL-1RI免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)，損傷后1h表達(dá)開始增多，4h達(dá)最大值，然后逐漸降低。與對(duì)照組比較，損傷后1h-12h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷后24h-48h組與對(duì)照組比較時(shí)差別有顯著意義(p＜0.05)，損傷后72h-5d組與對(duì)照組比較差別無(wú)顯著意義(p＞0.05)。海馬IL-1RI免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)在損傷后1h開始增多，損傷后4h達(dá)高峰，然后逐漸降低。與對(duì)照組比較，損傷后1h-12h組差別有極顯著

8、意義(p＜0.01)，損傷后24h-5d組與對(duì)照組比較時(shí)差別無(wú)顯著意義(p＞0.05)。腦干IL-1RI免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)趨勢(shì)同頂葉皮層和海馬。免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)在損傷后1h開始增多，損傷后4h達(dá)高峰，然后逐漸降低。與對(duì)照組比較，損傷后1h-8h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷后12h組與對(duì)照組比較時(shí)差別有顯著意義(p＜0.05)，24h-5d組與對(duì)照組比較差別無(wú)顯著意義(p＞0.05)。 研究結(jié)論： 1.正

9、常時(shí)皮層、海馬、腦干部位均有少量IL-1免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。腦損傷后皮層、海馬、腦干部位IL-1表達(dá)增強(qiáng)，免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目增多，損傷后30min皮層、海馬、腦干部位IL-1表達(dá)開始增強(qiáng)，2h達(dá)高峰，然后逐漸降低，損傷后24h-5d組IL-1表達(dá)接近正常。 2.正常時(shí)皮層、海馬、腦干部位均有少量IL-1RI免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。腦損傷后皮層、海馬、腦干部位IL-1RI表達(dá)增強(qiáng)，免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目增多，損傷后1h皮層、海馬、