生物膜銅綠假單胞菌MexAB-OprM及MexR的表達(dá).pdf

1、目的：研究銅綠假單胞菌在浮游態(tài)、生物膜態(tài)及經(jīng)亞胺培南、環(huán)丙沙星誘導(dǎo)下，外排泵MexAB-OprM及其負(fù)性阻遏蛋白MexR表達(dá)情況。 方法：用銅綠假單胞菌PAO1在eppendorf管內(nèi)建立生物膜，通過結(jié)晶紫快速染色法證實(shí)生物膜的形成。用1/2MIC的亞胺培南、環(huán)丙沙星對(duì)銅綠假單胞菌浮游菌誘導(dǎo)4小時(shí)；4MIC的亞胺培南、2MIC的環(huán)丙沙星對(duì)銅綠假單胞菌生物膜菌誘導(dǎo)12小時(shí)，分別于生物膜形成的第3天及第5天，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方

2、法，測(cè)定銅綠假單胞菌外排泵MexAB-OprM及MexR的基因表達(dá)。 結(jié)果：銅綠假單胞菌由浮游菌變?yōu)樯锬ぞ螅ǖ?天和第5天），其外排泵MexAB-OprM的表達(dá)水平明顯降低，其相對(duì)表達(dá)量最高相差近10倍，其差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而生物膜菌第3天和第5天相比，盡管MexAB-OprM相對(duì)表達(dá)量相差近3倍，但差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。銅綠假單胞菌由浮游菌變?yōu)樯锬ぞ螅ǖ?天和第5天），阻遏蛋白MexR表達(dá)

3、差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。生物膜菌第3天和第5天，其MexAB-OprM和MexR表達(dá)差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在亞胺培南及環(huán)丙沙星誘導(dǎo)后，浮游菌和生物膜菌其基因MexAB-OprM、MexR表達(dá)差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論：銅綠假單胞菌由浮游菌轉(zhuǎn)變?yōu)樯锬ぞ?，外排泵MexAB-OprM表達(dá)明顯減少，MexR基因表達(dá)無影響。生物膜菌的第3天與第5天，其MexAB-OprM、MexR基因表達(dá)無差別。