重度燒傷大鼠補充不同劑量核黃素后營養(yǎng)狀況變化的研究.pdf

1、目的:
　　對比觀察重度燒傷大鼠補充不同劑量(50mg/kg、100mg/kg和200mg/kg)核黃素后其全血紅細胞谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)(EGRAC)及血清總抗氧化能力(T-AOC)的變化、對創(chuàng)面膠原沉積的病理學的影響，探討重度燒傷大鼠傷后核黃素的適宜補充劑量，為深入研究燒傷患者核黃素的適宜補充劑量提供科學依據(jù)。
　　方法:
　　1.建立Wistar大鼠Ⅲ度燒傷模型
　　64只成年雄性Wistar大鼠，6～8

2、周齡，體重在150～180g范圍內(nèi)，給每只大鼠腹腔內(nèi)注射5％水合氯醛(250mg/kg)麻醉，麻醉后背部用4％硫化鈉褪毛。第2天再次麻醉后，將背部脫毛區(qū)置于100℃水中15秒，造成背部10％TBSAⅢ度燙傷(經(jīng)病理切片證實，以下稱燒傷)。燒傷后立即經(jīng)腹腔注射補充等滲鹽水(4ml/100g體重)抗休克，創(chuàng)面用涼紗布覆蓋。單籠喂養(yǎng)，自由進食。
　　2.實驗動物的分組
　　燒傷Wistar大鼠64只，隨機分為治療組Ⅰ16只、治療組

3、Ⅱ16只、治療組Ⅲ16只及對照組16只。傷后2小時開始予以核黃素。治療組大鼠分別經(jīng)灌胃予以不同劑量核黃素：治療組Ⅰ50mg/kg，治療組Ⅱ100mg/kg，治療組Ⅲ200mg/kg。核黃素每日補充1次，連續(xù)2周。對照組大鼠燒傷后不予注射核黃素。
　　3.觀察指標
　　1)全血紅細胞谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)(EGRAC)及血清總抗氧化能力(T-AOC)
　　治療組和對照組大鼠分別于燒傷后第1天、3天、7天和14天采集大鼠尾

4、血，使用BECKMANLX20全自動生化分析儀測定紅細胞谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)(EGRAC)，用721分光光度計測定血清總抗氧化能力(T-AOC)。
　　2)組織學檢查
　　于傷后7天每組隨機處死半數(shù)大鼠，切取部分創(chuàng)面組織塊，制作石蠟包埋切片，行HE染色進行光鏡組織學觀察。光鏡下觀察每例切片隨機選擇5個高倍視野(HE，10×40)，分別觀察每一高倍鏡視野的成纖維細胞數(shù)量，炎癥反應程度(以炎細胞數(shù)量及炎性壞死滲出綜合考慮)，表

5、皮細胞生長情況及膠原纖維情況。傷后14天處死剩余大鼠，以同樣方處理。
　　3)燒傷創(chuàng)面羥脯氨酸(HOP)含量檢測
　　取上述創(chuàng)面組織塊，采用化學比色法測定創(chuàng)面HOP含量的變化，觀察創(chuàng)面修復過程中膠原蛋白含量的變化。
　　4.統(tǒng)計方法
　　采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。所有計量資料均已均數(shù)±標準差(x±s)表示，同組間不同時間的均數(shù)比較采用方差分析，不同組間相同時間的均數(shù)比較采用方差分析，組間差異采用配

6、對q檢驗分析；計數(shù)資料比較采用卡方檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:
　　1.全血紅細胞谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)(EGRAC)及血清總抗氧化能力(T-AOC)測定
　　治療組予以補充核黃素后，相同時間段內(nèi)出現(xiàn)的核黃素缺乏的例數(shù)均明顯較對照組少，血清總抗氧化能力比對照組明顯增強，差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。傷后7～14天，治療組Ⅱ與治療組Ⅲ大鼠核黃素缺乏及血清總抗氧化能力的改善情況均優(yōu)于治療組Ⅰ，

7、差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；治療組Ⅲ與治療組Ⅱ大鼠相比較，核黃素缺乏及血清總抗氧化能力的改善情況不明顯，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　2.組織學檢查
　　傷后第7天、第14天，各組創(chuàng)面均表現(xiàn)為急慢性炎癥反應，3個治療組成纖維細胞數(shù)和新生表皮層數(shù)較對照組少，差別顯著，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；治療組Ⅲ明顯高于治療組Ⅰ與治療組Ⅱ，治療組Ⅰ與治療組Ⅱ間無明顯差異。創(chuàng)面H-E染色顯示傷后治療組Ⅲ炎癥反應較

8、治療組Ⅰ、治療組Ⅱ及對照組輕。
　　3.創(chuàng)面羥脯氨酸(HOP)含量檢測
　　治療組與對照組創(chuàng)面羥脯氨酸(HOP)含量在創(chuàng)面愈合過程中隨時間逐漸增加，各治療組創(chuàng)面HOP平均含量比對照組創(chuàng)面HOP平均含量增長幅度小，同一時間各治療組創(chuàng)面HOP含量低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。各治療組間差異不明顯(P>0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.重度燒傷大鼠傷后機體缺乏核黃素，每天予以補充后，能減少重度燒傷大鼠