銀杏葉提取物對(duì)早期中耳放射性損傷防護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討銀杏葉提取物(Ginkgo Biloba extract，EGB)對(duì)放射性中耳炎動(dòng)物模型早期中耳放射性損傷的防護(hù)作用。 方法：1．選用瀘州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供的標(biāo)準(zhǔn)清潔級(jí)成年白色紅目雄性豚鼠44只，體重300～350g，3月齡；健康，耳廓preyer反射敏感，耳鏡檢查外耳道皮膚無紅腫，鼓膜完整、無充血，無中耳炎及上呼吸道感染跡象。將44只豚鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照1天組(10只)、模型對(duì)照30天組(10只)、銀杏葉提取物治

2、療1天組(10只)和銀杏葉提取物治療30天組(10只)、空白對(duì)照組(4只)5組。2．照射豚鼠以醫(yī)用直線加速器6MV-X線射線照射右耳，3.0Gy/次，總劑量45Gy，每周5次。加用銀杏葉提取物的豚鼠每次照射前30 min腹腔內(nèi)注射銀杏葉提取物0.4ml/kg，模型對(duì)照組則腹腔內(nèi)注射同等體積生理鹽水，空白對(duì)照組不作處理。分別于照射45Gy后第2天和第30天處死豚鼠，取下動(dòng)物頭部并沿其正中矢狀面剖開，剪開硬腭、軟腭，分開兩側(cè)頭部，照射組取照

3、射側(cè)耳，正常組取雙側(cè)耳，暴露咽鼓管咽口，在解剖顯微鏡下自咽口游離出咽鼓管至顳骨，連同聽泡一起取下，在鼓室后上壁開窗，自鼓環(huán)深處將鼓膜與聽泡分開，將鼓室內(nèi)粘膜及咽鼓管從骨壁上取下。放入4％多聚甲醛液內(nèi)固定后進(jìn)行脫水，石蠟包埋，切片，經(jīng)脫蠟后水洗，進(jìn)行常規(guī)HE染色，中性樹脂封片行病理檢查，并將標(biāo)本用0.1M磷酸緩沖液沖洗2次，2.5％戊二醛固定液作用4h，0.1M磷酸緩沖液漂洗10min共3次，梯度乙醇脫水(30％→50％→70％→80％→

4、90％)每次10min，100％乙醇15min，100％乙醇再作用20min，乙酸異戊脂置換，CO2臨界點(diǎn)干燥，最后鍍膜。行光鏡觀察中耳粘膜(咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬)的病理改變情況，黏膜厚度，白細(xì)胞浸潤數(shù)；掃描電鏡檢查在5000倍下選取2個(gè)視野觀察纖毛的形態(tài)、數(shù)量、方向，并對(duì)纖毛損傷程度進(jìn)行分級(jí)。通過光鏡及掃描電鏡檢查，觀察各組豚鼠照射側(cè)中耳黏膜病理和超微結(jié)構(gòu)改變。3．計(jì)量資料采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(-X±s)表示，多組間比較用方差分析，用S

5、PSS統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析，規(guī)定P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：豚鼠44只均進(jìn)入結(jié)果分析。經(jīng)45Gy射線照射后第2天，模型組豚鼠中耳黏膜上皮增厚，炎性細(xì)胞浸潤，纖毛倒伏、融合，滲出增多；照射后第30天中耳黏膜上皮纖毛脫落、減少，損傷加重；照射前應(yīng)用銀杏葉提取物的豚鼠中耳黏膜損傷明顯小于模型組豚鼠，放射線照射后第2天，中耳黏膜上皮稍增厚，有炎性細(xì)胞浸潤，纖毛有輕微粘連，無倒伏、融合；照射后第30天，中耳黏膜無明顯增厚，少量炎性細(xì)

6、胞浸潤，纖毛無倒伏、融合及明顯缺失。模型組較治療組中耳黏膜厚度及白細(xì)胞浸潤數(shù)增高(均P<0.05)，治療組第30天較治療組第2天中耳黏膜厚度及白細(xì)胞浸潤數(shù)有降低(均P<0.05)。 結(jié)論：放射線可致中耳黏膜黏液纖毛輸送系統(tǒng)功能受損，并隨時(shí)間推移而加重；銀杏提取物可以減輕中耳的早期放射損傷，并隨時(shí)間推移有進(jìn)一步好轉(zhuǎn)，其機(jī)制可能是通過擴(kuò)張血管，降低血液粘滯度減少血管損傷及缺氧引起的中耳損傷；通過減輕炎癥反應(yīng)減少中耳損傷；中和及清除自