乳腺癌患者外周血CK-7、CK-20、hMAM、C-erbB-2、VEGFR-1、VLA-4的表達研究.pdf

1、目的:應用RT-PCR技術檢測乳腺癌患者外周血中的細胞角蛋白7(Cytokeratin-7，CK-7)、細胞角蛋白20(Cytokeratin-20，CK-20)、人乳腺珠蛋白(humanmammaglobin，hMAM)、C-erbB-2、血管內皮生長因子受體1(vascularendothelial growth factor acceptor 1，VEGFR-1)、黏附分子非常延遲抗原4(adhesion molecules of

2、 very late antigen 4，VLA-4，又名integrina<,4>β<,1>，即整合素a<,4>β<,1>)，評價這些標志物與臨床的關系，探索它們在微轉移中的意義。 方法:本研究共收集標本202例，取自2004年12月至2006年12月我院附屬醫(yī)院所收治韻40例乳腺癌患者，44例肺癌、21例鼻咽癌、17例消化道腫瘤、13例生殖道腫瘤、11例惡性淋巴瘤、9例泌尿道腫瘤、6例頭頸部其他腫瘤、5例肝膽腫瘤、5例其他腫

3、瘤、10例乳腺增生、纖維腺瘤等良性乳腺疾病患者，并以21例健康志愿者作對照，MCF-7乳腺癌細胞系作實驗敏感性指標。取外周血分離收集淋巴細胞，提取RNA，以GAPDH為內參照，RT-PCR技術檢測CK-20、hMAM、C-erbB-2、VEGFR-1、VLA-4；同時，在檢測目的基因引物特異性基礎上，通過SYBR Green熒光定量技術對CK-7的相對表達水平進行分析。統(tǒng)計學方法：以卡方檢驗和四格表確切概率法分析。 結果:

4、 (1)敏感性測定：內參GAPDH和目的基因CK-7、CK-20、C-erbB-2的敏感性為10<'7>，VEGFR-1為10<'-6>，hMAM為10<'-5>， MCF-7細胞不表達VLA-4。 (2)定性分析：①正常健康對照、乳腺良性疾病、惡性淋巴瘤均不表達VEGFR-1。正常健康對照CK-7、CK-20、C-erbB-2、VLA-4的相對表達水平分別為28.57％(6/21)、4.76％(1/21)、19.05％(4/

5、21)、9.52％(2/21)；乳腺良性疾病病人CK-7、CK-20、C-erbB-2、hMAM、VLA-4的相對表達水平分別為20.0％(2/10)、10.0％(1/10)、40.0％(4/10)、10.0％(1/10)、10.0％(1/10)。②乳腺癌CK-7的相對表達水平為90.0％(36/40)、CK-20為77.5％(31/40)、C-erbB-2為82.5％(33/43)、VLA-4為57.5％(23/43)，高于鼻咽癌、消

6、化道腫瘤、惡性淋巴瘤、乳腺良性疾病和正常對照的表達(P<0.05)；乳腺癌CK-7、CK-20、C-erbB-2的表達也高于生殖道腫瘤、其他腫瘤(P<0.05)；乳腺癌CK-7、C-erbB-2、VLA-4的表達高于肺癌(P<0.05)：乳腺癌CK-7、CK-20、VLA-4的表達高于頭頸部其他腫瘤(P<0.05)：乳腺癌CK-20、C-erbB-2、VLA-4的表達高于泌尿道腫瘤(P<0.05)：乳腺癌hMAM的表達在各腫瘤和乳腺良性

7、疾病、正常健康對照間無顯著差異，僅泌尿道腫瘤hMAM的表達明顯高于乳腺癌(P<0.001)；2.5％的乳腺癌(1/40)和29.55％的肺癌(13/44)可表達VEGFR.1，肺癌顯著高于乳腺癌(P<0.001)。③各標志物在乳腺癌、肺癌、鼻咽癌各期中的表達無顯著差異。 (3)CK-7相對定量分析結果表明，①Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期的乳腺癌、肺癌、鼻咽癌的CK-7相對表達量逐漸升高，乳腺癌Ⅳ期CK-7的相對表達量最高。②對同一病人

8、進行動態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)a.術前表達高于術后。b.出現(xiàn)轉移或復發(fā)時相對表達量增加。c.腫塊縮小或病情穩(wěn)定時相對表達量減少。 結論:(1)用RT-PCR方法檢測乳腺癌患者外周血中的腫瘤標志物，在乳腺癌微轉移診斷及預后判斷中具有重要意義。(2)CK-7、CK-20、C-erbB-2、VLA-4、VEGFR-1可以作為外周血檢測乳腺癌微轉移的敏感標志物。(3)CK-7可以作為上皮性腫瘤治療效果的動態(tài)監(jiān)測指標。(4)hMAM不能作為乳腺癌微轉移