小鼠嗅鞘細(xì)胞的免疫組化和分類鑒定.pdf

1、脊髓損傷即使是局部的損傷也會(huì)造成嚴(yán)重的后果,可能造成局部永久性的癱瘓,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量,也會(huì)給患者的家庭和社會(huì)帶來嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)和損失。研究人員發(fā)現(xiàn)脊髓神經(jīng)損傷后有可能通過細(xì)胞移植、基因治療或者轉(zhuǎn)基因細(xì)胞移植來修復(fù)。研究表明,在眾多的移植修復(fù)中樞神經(jīng)損傷的細(xì)胞候選者中,OECs被列為最為理想的一種細(xì)胞。
　　 OECs細(xì)胞膜上有與細(xì)胞黏附和促進(jìn)神經(jīng)再生有關(guān)的分子,這些分子可以為神經(jīng)軸突的再生建立良好的內(nèi)在環(huán)境,有助于受損軸突的

2、伸長、生長,促進(jìn)軸突向靶區(qū)延伸,幫助神經(jīng)功能恢復(fù)。目前,有數(shù)據(jù)顯示OECs可以促進(jìn)小鼠坐骨神經(jīng)再生,可以促進(jìn)小鼠脊髓束半切模型的軸突延長生長等。
　　 現(xiàn)在,應(yīng)用比較成熟的嗅鞘細(xì)胞體外培養(yǎng)方法是NASH差速貼壁法。NASH差速貼壁法主要是利用成纖維細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和成鞘細(xì)胞的貼壁時(shí)間不同而將它們分離開來。培養(yǎng)的OECs可表現(xiàn)出多種細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞表面標(biāo)志。最常見的主要有兩種,一種是類神經(jīng)膜細(xì)胞型,表達(dá)p75NTR受體。主要分布于

3、外周嗅神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi),呈紡錘形。一種就是類星形膠質(zhì)細(xì)胞型,主要分布在小鼠嗅球內(nèi),多數(shù)扁平。缺乏p75NTR受體,但GFAP成免疫陽性。我們利用GFAP免疫組化鑒定體外培養(yǎng)的嗅鞘細(xì)胞的純化能力。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用改良的NASH法差速貼壁和阿糖胞苷純化培養(yǎng)小鼠嗅球原代嗅鞘細(xì)胞,利用GFAP鑒定了體外培養(yǎng)的細(xì)胞純度。利用抗PSA-NCAM和抗L-NGFr兩種抗體將培養(yǎng)的細(xì)胞分類,嘗試研究OECs不同表型的關(guān)系,希望進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)不同株系OEC