短管兔耳草正丁醇提取物抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)活性的研究.pdf

1、目的：短管兔耳草是傳統(tǒng)藏醫(yī)中經(jīng)常使用的一味藏藥。本試驗用短管兔耳草正丁醇提取物，研究其誘導胃癌SGC-7901細胞凋亡的活性；探討其對荷S180肉瘤小鼠的抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用，為這一珍貴植物資源的開發(fā)提供實驗研究依據(jù)。 方法：將SGC-7901細胞與不同濃度的短管兔耳草正丁醇提取物共同培育，用MTT比色法檢測藥物對該細胞株增殖的抑制作用；用熒光顯微鏡、透射電鏡觀察細胞的形態(tài)學變化并照相；用瓊脂糖電泳法檢測細胞凋亡過程中DNA碎片

2、的形成；用流式細胞分析儀測定細胞的凋亡率。制備荷S180肉瘤的小鼠模型，將小鼠分為生理鹽水陰性對照組、環(huán)磷酰胺陽性對照組、短管兔耳草正丁醇提取物實驗組(500～1500mg/Kg·d，連續(xù)灌胃給藥7天)，同時建立空白對照組(不接種腫瘤，每日用0.9％生理鹽水灌胃)。分離腫瘤組織稱重并計算抑瘤率；用MTT比色法測定荷S180肉瘤小鼠T淋巴細胞的增殖作用；放射免疫法測定小鼠血清中IL-2、TNF-a的含量；血凝實驗檢測小鼠血清中抗綿羊紅細胞

3、抗體的凝集效價。 結果：1.短管兔耳草正丁醇提取物在0.34～21.60mg/ml的范圍內(nèi)對胃癌SGC-7901細胞株的增殖有明顯的抑制作用，且抑制作用隨藥物濃度的增加和作用時間的延長而增強(P＜0.01orP＜0.05)。 2.短管兔耳草正丁醇提取物1.35～2.7mg/ml與SGC-7901細胞株共同培養(yǎng)48小時后，觀察到細胞凋亡的形態(tài)特征；流式細胞儀通過對單個細胞性狀的快速測定，在DNA染色后，形成一個DNA含量＜

4、2n(即＜G1期細胞)的分布區(qū)，即“亞G1峰”；在瓊脂糖凝膠上進行電泳，出現(xiàn)明顯的具有生化特征的“DNALadder”。 3.短管兔耳草正丁醇提取物在1000mg/Kg·d及1500mg/Kg·d的濃度時，對荷S180肉瘤小鼠的腫瘤組織有顯著抑制作用(p＜0.01)，抑瘤率分別為37％、48％。 4.短管兔耳草正丁醇提取物在PHA的刺激下能增強荷S180肉瘤小鼠T淋巴細胞增殖反應能力(P＜0.05)。 5.短管兔

5、耳草正丁醇提取物在1000～1500mg/Kg·d濃度時，增加了荷S180肉瘤小鼠血液中IL-2及TNF-a的含量(P＜0.05)。 6.短管兔耳草正丁醇提取物在1000～1500mg/Kg·d濃度時，增加了小鼠血清中抗綿羊紅細胞抗體的含量(P＜0.05)。 結論：1.短管兔耳草正丁醇提取物在體外對胃癌SGC-7901細胞株的增殖有明顯抑制作用，能夠誘導胃癌SGC-7901細胞系的凋亡。 2.短管兔耳草正丁醇提取