樟芝液體發(fā)酵提取物抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、1、采用MTT比色法，對樟芝生物學(xué)特性試驗的88個提取物進行了體外藥理活性的研究。篩選出對胃癌SGC7901有抑制作用的提取物52個，對肝癌HepG2有抑制作用的提取物52個，對肺癌A549具有抑制作用的提取物33個，其中有8個提取物對三種癌細胞都有抑制作用。明確了不同提取物對同種細胞的活性作用和最佳作用濃度不同;而同一個提取物對不同的靶細胞活性作用及作用濃度也不同。另外，也檢測了部分提取物對人正常組織來源的肝細胞HL7702的細胞毒作

2、用，結(jié)果顯示，無任何細胞毒性，且有利于正常細胞HL7702的增殖。部分提取物與化療藥物聯(lián)合作用，可以減少或抵消化療藥物5Fu的細胞毒作用，說明可以作為化療藥物的輔助藥物進行研究和開發(fā)。
　　 2、采用MTT比色法，檢測了樟芝提取物對小鼠肝癌H22的體外抑制作用，結(jié)果顯示四樣品均有抑制作用，其中SBAC抑制作用較大，在濃度為15mg/ml時，抑制率最大為63.07％。對小鼠肉瘤S180的體外抑制作用結(jié)果顯示:四樣品也都具有抑制作用

3、，其中SBAC在濃度為15mg/ml時達到最大77.99％;PAAC濃度為15mg/ml時，抑制率也達到最大為79.37％。四個樟芝樣品與環(huán)磷酰胺聯(lián)合抑制人肝癌HepG2，其抑制作用均減小;而在環(huán)磷酰胺損傷HepG2細胞后，除PBAC外，均促進細胞的增殖，表明樟芝提取物具有修復(fù)細胞的作用。
　　 3、依據(jù)GB15193.3-1994急性毒性試驗國家標(biāo)準(zhǔn)，設(shè)計了樟芝提取物的急性毒性試驗。結(jié)果顯示:在樟芝提取物劑量為22.90g/k

4、g，小鼠的死亡率為25％，不足50％，可以推斷EPAC的LD50大于22.90g/kg體重。按照國家標(biāo)準(zhǔn)半數(shù)致死劑量分級LD50＞15g/kg的物質(zhì)為無毒級物質(zhì)。因此，實驗結(jié)果顯示EPAC安全可靠，且在試驗期間各組動物活動正常，毛色光澤度好，無任何中毒癥狀。
　　 4、采用建立肝癌H22荷瘤小鼠模型的方法，檢測樟芝提取物SBAC體內(nèi)抗腫瘤作用。測定了各試驗組小鼠的體重、采食量、瘤重等指標(biāo)，結(jié)果顯示:高劑量組(500mg/kg)、

5、中劑量組(250mg/kg)、低劑量組(125mg/kg)，抑瘤率分別為11.02％、42.79％、48.83％，說明SBAC對H22荷瘤小鼠有抑瘤作用。而聯(lián)合組(250mg/kg、5Fu)、陽性對照組(5Fu組)，抑瘤率分別為14.93％、73.67％，且試驗過程中,SBAC組比對照組體重和采食量均有顯著提高，與化療藥物聯(lián)合作用，減輕了化療藥物對小鼠機體的損傷，體重和采食量均有所提高。
　　 5、通過檢測脾臟、肝臟、腎臟、胸腺

6、等臟器指數(shù)，測定自然殺傷細胞、T/B淋巴細胞和巨噬細胞的活性，研究了SBAC對H22荷瘤小鼠有明顯的免疫調(diào)節(jié)作用，結(jié)果表明:SBAC組的臟器指數(shù)顯著高于對照組，尤其是胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，最高值分別為4.307、9.563;T淋巴細胞刺激指數(shù)在劑量為125mg/kg時最高為0.976，明顯高于對照組;而SBAC在劑量為250mg/kg時，NK細胞活性也最高，達到200.79％，顯著高于對照組;SBAC組小鼠的巨噬細胞在250mg/kg時，