P物質(zhì)和降鈣素基因相關(guān)肽對成骨細(xì)胞的增殖和堿性磷酸酶活性的影響.pdf

1、在正畸牙齒移動過程中，發(fā)現(xiàn)牙周內(nèi)P物質(zhì)(SP)和降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)表達(dá)明顯增強(qiáng)。牙周神經(jīng)肽和正畸之間存在著密切的聯(lián)系。但SP和CGRP在正畸組織改建中發(fā)揮什么樣的作用?其機(jī)制如何?目前還不清楚。本研究采用體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法，觀察SP、CGRP對大鼠成骨細(xì)胞的增殖和堿性磷酸酶(ALP)活性的影響。為深入了解SP、CGRP在正畸組織改建中的作用和機(jī)制提供一些理論參考依據(jù)。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下： 1、大鼠成骨細(xì)胞的原代培養(yǎng)

2、、純化及鑒定 本實驗采用新生SD大鼠顱蓋骨通過酶消化法與組織塊法相結(jié)合進(jìn)行成骨細(xì)胞的原代培養(yǎng)，并利用差速粘附法對原代細(xì)胞純化。采用堿性磷酸酶染色、Vonkossa染色、四環(huán)素染色方法對細(xì)胞進(jìn)行鑒定，三種染色結(jié)果均呈陽性表明了培養(yǎng)的細(xì)胞為成骨細(xì)胞。 2、P物質(zhì)對成骨細(xì)胞的增殖和ALP活性的影響 用含有終濃度為0、1×10-12、1×10-10、1×10-8、1×10-6mol/L的SP作用成骨細(xì)胞，觀察SP對成骨細(xì)

3、胞的增殖和ALP活性的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)SP在1×10-10mol/L，1×10-8mol/L，1×10-6mol/L時，對細(xì)胞計數(shù)結(jié)果均有影響，與對照組比較均有顯著差異(p＜0.05)；在1×10-8mol/L時對MTT計數(shù)及ALP活性結(jié)果影響最大。當(dāng)SP在1×10-8mol/L時，對細(xì)胞周期影響最大，S+G2/M期細(xì)胞數(shù)量最多。 3、CGRP對成骨細(xì)胞的增殖和ALP活性的影響 選用含有終濃度為0、1×10-12、1×10